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Abstrait
Une PCR imbriquée à haute sensibilité pour la détection de Toxoplasma gondii dans des échantillons d'animaux et d'aliments
Maria Vitale, Paola Galluzzo, Vittoria Currò, Kataryna Gozdzik, Domenico Schillaci et Vincenzo Di Marco Lo Presti
Toxoplasma gondii est un parasite majeur transmis par les aliments et l'eau dans le monde entier. Les échantillons de tissus et de viande de nombreux animaux à sang chaud peuvent contenir des kystes tissulaires dus à la toxoplasmose chronique. L'eau et les légumes peuvent être contaminés par les oocystes parasitaires excrétés dans les excréments des chats infectés, qui constituent l'hôte définitif du parasite.
Une PCR sensible pour la détection de Toxoplasma gondii est décrite. La première étape a amplifié la région entre l'ADNr 28S et 18S dans les parasites étroitement apparentés T. gondii et Neospora caninum ; l'analyse RFLP a distingué l'ADN des deux parasites morphologiquement identiques. Bien que N. caninum ne soit pas impliqué dans la transmission humaine, il est jusqu'à présent important pour la santé animale car il est un responsable majeur de l'avortement chez les bovins.
La PCR imbriquée a été utilisée dans un test de dilution sur des échantillons de saucisses de porc enrichis avec de l'ADN parasitaire de T. gondii. L'analyse a montré que jusqu'à 200 fg, équivalent à deux parasites simples, pouvaient être détectés. Une limite de détection similaire pour T. gondii peut être obtenue avec des PCR en temps réel, mais les méthodes en temps réel nécessitent des consommables spéciaux et un équipement coûteux.