Journal de bactériologie et parasitologie

Abstrait

Méthode simple de détection visuelle du virus Zika humain utilisant l'amplification isotherme médiée par la boucle de transcription inverse

Yang Li1,2, Zhenzhou Wan3, Yi Zhou2,4, Xia Jin5, Haifeng Shi1* et Chiyu Zhang 2*

Le virus Zika (ZIKV) est un agent pathogène émergent transmis par les moustiques et appartient à la famille des Flaviviridae, genre Flavivirus. L'infection par le ZIKV a été associée à une microcéphalie et à une stérilité masculine. La surveillance de l'infection par le ZIKV est importante pour la santé reproductive humaine et le contrôle de la propagation du virus. Le développement d'un test rapide et sensible pour la détection du ZIKV est nécessaire de toute urgence pour la Chine et d'autres pays d'Asie du Sud-Est. Ici, nous avons développé un test d'amplification isotherme médiée par boucle de transcription inverse (RT-LAMP) en une seule étape et sur un seul tube pour la détection du ZIKV. Le test a une limite de détection (LOD) de 88 copies d'ARN Zika par réaction de 25 μl et peut être réalisé en 20 minutes lorsque l'entrée du modèle est supérieure à la LOD. De plus, il présente une spécificité élevée et une bonne reproductibilité. Il est important de noter que le résultat peut être visualisé par changement colorimétrique lorsque du HNB ou de la calcéine est utilisé. Pour évaluer la viabilité du test, une comparaison entre le test RT-LAMP et un test RT-qPCR plus conversionnel a été réalisée en utilisant 20 surnageants de culture cellulaire et trois échantillons d'urine. Le test ZIKV RT-LAMP a montré une concordance parfaite dans la détection avec le test RT-qPCR. Ces résultats démontrent que le test ZIKV RT-LAMP nouvellement développé est simple, rapide et bien adapté à la surveillance du virus ZIKV, en particulier dans les régions aux ressources limitées.