Journal de bioéquivalence et de biodisponibilité

Abstrait

Une approche systématique pour surmonter l'effet de matrice lors de l'analyse LC-ESI-MS/MS par différentes techniques d'extraction d'échantillons

Chinmoy Ghosh, Shashank Gaur, Chandrakant P. Shinde et Bhaswat Chakraborty

L'effet de matrice (ME) est une préoccupation majeure lors de toute analyse LC-ESI-MS/MS. Il affecte la reproductibilité, la sensibilité et la fiabilité de ces techniques analytiques. Il n'existe cependant aucune approche standardisée permettant de surmonter les problèmes liés à l'effet de matrice. L'approche varie d'une molécule à l'autre. Nous avons examiné ici que la technique d'extraction d'échantillons est une approche permettant de surmonter l'effet de matrice lors de la bioanalyse LC-MS/MS. Trois types de techniques d'extraction conventionnelles, à savoir la précipitation des protéines, l'extraction liquide-liquide et l'extraction en phase solide (SPE), ont été utilisés lors de l'extraction de la névirapine à partir du plasma humain. Il a été observé que l'échantillon de névirapine préparé par SPE élimine ou réduit considérablement les effets de matrice ipso facto. Les échantillons de protéines précipitées présentaient le degré le plus élevé d'effet de matrice avec un facteur de matrice moyen de 0,30 ; l'extraction liquide-liquide avait un facteur de matrice moyen de 0,80 ; et le facteur de matrice obtenu par extraction en phase solide était de 0,99. Différents phospholipides ont été identifiés en effectuant le balayage des ions précurseurs à m/z 104 et 184, qui interféraient avec l'analyte pendant l'élution chromatographique. L'expérience a permis d'observer que les phospholipides retenus depuis longtemps avaient un rôle important sur l'élution chromatographique. Il est donc recommandé d'observer les phospholipides pendant le balayage des précurseurs pendant une période qui est au moins trois fois supérieure à la durée réelle de l'analyse. Parmi toutes les techniques d'extraction appliquées, l'extraction en phase solide produit l'échantillon le plus propre et la précipitation au méthanol produit l'échantillon le plus sale en raison de la forte solubilité des phospholipides dans celui-ci.