Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Une méthode améliorée et sensible pour l'estimation de la vitamine D3 par RPHPLC

Subodh Kumar, Diwesh Chawla et Ashok Kumar Tripathi

Malgré l'abondance du soleil, la carence en vitamine D (VDD) en Inde est une épidémie. 50 à 90 % de la population, toutes tranches d'âge confondues, est associée à la VDD. Parmi les méthodes courantes (RIA, immuno-essai, etc.) disponibles pour l'estimation de la vitamine D, la méthode analytique comme la HPLC est considérée comme la référence. Dans l'étude proposée, nous avons développé une méthode RP-HPLC pour l'estimation de la vitamine D3 avec une plus grande précision et exactitude. La séparation a été réalisée sur une colonne C18 en mode isocratique en utilisant deux phases mobiles différentes, à savoir l'acétonitrile : méthanol (méthode I) et le méthanol : eau avec 0,1 % d'acide formique (méthode II). La colonne a été maintenue à 40 °C et la phase mobile a été pompée à un débit de 0,4 mL min−1. La détection de l'éluant a été réalisée à λmax 265 nm. Français Le temps de rétention de la vitamine D3 pour les méthodes I et II s'est avéré être respectivement de 7,14 et 7,01 minutes, avec R2 > 0,99. Les courbes standard étaient linéaires sur la plage de concentrations de 0,5 à 5 ng mL−1. Les valeurs LOD et LOQ pour la vitamine D3 pour les méthodes I et II se sont avérées être respectivement de 1,64, 5,02 et 1,10, 3,60 ng mL−1. Le pourcentage de récupération s'est avéré être de 69 à 79 % et de 75 à 87 % pour les méthodes I et II, respectivement. Le % RSD de la précision intra et inter-journalière de la méthode I s'est avéré < 2 et < 7 %, tandis que, pour la méthode II, il était respectivement < 2 et < 4 %. En conclusion, la méthode II a montré une plus grande précision et une plus grande exactitude et est également rentable, par conséquent, elle peut être utilisée pour l'estimation de la vitamine D3 à l'échelle du laboratoire.