Journal de la technologie microbienne et biochimique

Abstrait

Bandelette de test anti-LPS pour la détection des aliments contaminés par Salmonella et E. coli

Alvin Wang, Gabriel Molina, Victor Prima et Kevin KW Wang

Les entérobactéries telles que E. coli et Salmonella libèrent une endotoxine, ou lipopolysaccharide (LPS), qui contribue aux symptômes d'intoxication alimentaire. Nous émettons l'hypothèse que le LPS pourrait être détecté par un simple test sur bandelette, détectant ainsi la présence d'entérobactéries dans les aliments. Nous décrivons ici le développement d'un nouveau test de détection sur bandelette anti-LPS. Des bandelettes de test en polystyrène flexible avec une membrane absorbante en poly(fluorure de vinylidène) collée à une extrémité ont été exposées à diverses dilutions de sources alimentaires ou bactériennes. Cette étape a été suivie d'une incubation séquentielle avec un anticorps primaire anti-LPS, un anticorps secondaire biotinylé et une enzyme liée à la streptavidine, la phosphatase alcaline. La bandelette de test a ensuite été développée avec un substrat 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate/nitroblue tetrazolium. Ainsi, la présence d'un produit précipité violet indiquerait la présence de LPS et d'entérobactéries. L'intensité ou l'obscurité de la couleur a été quantifiée par densitométrie et comparée à la courbe standard LPS. Le test par bandelettes réactives s'est avéré capable de détecter facilement des concentrations aussi faibles que 25 ng/ml de LPS purifié. De plus, le test par bandelettes réactives anti-LPS peut détecter et quantifier de manière sensible les LPS libérés par E. coli vivant dans les milieux de culture. Enfin, trois groupes d'aliments (tranches de fraises, feuilles d'épinards et bœuf haché) ont été inoculés avec E. coli pendant deux points de temps à température ambiante, puis l'eau de rinçage de chaque préparation alimentaire a été soumise au test par bandelettes réactives anti-LPS. Pour les trois groupes d'aliments, le test par bandelettes réactives peut facilement détecter et quantifier la contamination bactérienne de 8 h et de 24 h par rapport à leurs témoins respectifs non contaminés. En conclusion, un prototype simple de test par bandelettes réactives anti-LPS a été développé pour détecter facilement la contamination par les entérobactéries des aliments courants.