Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Critères d'évaluation de la biocompatibilité pour les nouveaux matériaux de xénogreffe : distribution et quantification de l'acide nucléique résiduel et de l'épitope alpha-Gal

Naso Filippo, Aguiari Paola, Iop Laura, Spina Michele et Gerosa Gino

Objectif : Les supports xénogéniques décellularisés commercialisés sont actuellement utilisés pour la guérison des tissus malades. Curieusement, leur utilisation est autorisée même en l'absence de toute évaluation de l'élimination du matériel cellulaire xénogénique, comme les épitopes alpha-Gal. De plus, les procédures de décellularisation ne sont pas surveillées pour prouver l'élimination du potentiel calcifiant associé aux résidus d'acides nucléiques. Le traitement actuel au glutaraldéhyde n'est pas en mesure d'assurer une immunotolérance complète des tissus xénogéniques implantés, réduisant mais n'éliminant pas l'immunogénicité, en particulier pour l'épitope alpha-Gal (le principal obstacle au succès de la xénotransplantation). Récemment, notre groupe a largement rapporté des études axées sur l'évaluation des propriétés de biocompatibilité des tissus xénogéniques. Dans ce rapport, nous effectuons cette enquête et la détection d'acides nucléiques sur de nouveaux tissus xénogéniques qui ont montré des résultats précliniques/cliniques très prometteurs dans différents domaines d'application. Méthodes : La quantification de l'alpha-Gal a été réalisée par un test ELISA précédemment développé et breveté par notre équipe de recherche qui implique l'utilisation de l'anticorps monoclonal anti-alpha-Gal M86. Une analyse d'immunofluorescence a été réalisée pour la distribution visuelle des épitopes xénogéniques et des résidus d'acides nucléiques. Enfin, pour la quantification totale de l'ADN, un kit disponible dans le commerce a été adopté. Résultats : Alors que la quantité et la distribution des épitopes alpha-Gal se sont révélées différentes entre les biomatériaux étudiés, la présence de restes d'acides nucléiques s'est révélée être une caractéristique commune, même dans les tissus livrés sous forme acellulaire par le fabricant. Conclusion : Des évaluations quantitatives insuffisantes réalisées au niveau préclinique sur le contenu résiduel d'épitopes xénogéniques, de détergents et de matériaux d'acides nucléiques dans les échafaudages ont conduit à des résultats décevants et désastreux. Le risque de voir se reproduire ces accidents dramatiques reste très élevé à moins que des paramètres de sécurité, parmi lesquels l’élimination complète des déterminants xénogéniques majeurs (alpha-Gal) et des résidus d’acides nucléiques sujets à la calcification , ne soient identifiés et introduits dans les pratiques de fabrication.