Journal de bactériologie et parasitologie

Abstrait

Caractérisation des protéines solubles et liées à la membrane de Toxoplasma gondii comme marqueurs diagnostiques de l'infection

Imen Khammari, Sami Lakhal, Benoît Westermann, Alia Benkahla, Aïda Bouratbine, Alain Van Dorsselaer, Moncef Ben Saïd, Christine Schaeffer-Reiss et Fatma Saghrouni

Dans la présente étude, nous avons appliqué la combinaison de l'électrophorèse sur gel unidimensionnelle, de l'immunoblot et de la chromatographie liquide nano-spectrométrie de masse en tandem (nanoLC-MS/MS) pour identifier les protéines immunogènes potentielles des tachyzoïtes de Toxoplasma gondii qui peuvent être utilisées pour le développement de tests fiables dans le sérodiagnostic de la toxoplasmose acquise chez les sujets immunocompétents. À cette fin, nous avons développé un immunoblot utilisant des extraits solubles et membranaires de tachyzoïtes de Toxoplasma gondii GT1 et testé 194 sérums positifs et 100 sérums négatifs obtenus auprès de femmes enceintes.

Cinq bandes d'antigènes solubles (98 kDa, 36 kDa, 33 kDa, 32 kDa et 21 kDa) et 4 bandes d'antigènes membranaires (41 kDa, 35 kDa, 32 kDa et 30 kDa) ont été sélectionnées comme les plus intéressantes en termes de sensibilité et de spécificité. Parmi ces bandes, seules 2 bandes d'antigènes solubles (33 kDa et 32 ​​kDa) et 2 bandes d'antigènes membranaires (32 kDa et 30 kDa) ont montré une spécificité ≥ 90 %.

Après analyse par spectrométrie de masse et bioinformatique, 7 protéines ont été identifiées comme marqueurs potentiels pour le sérodiagnostic de la toxoplasmose. Ces protéines sont : SRS34A, GRA7, GRA1, DG32, MIC5, ROP5 et Toxofilin. Ces protéines ont montré une homologie de 86% à 100% avec les protéines des souches VEG et ME49 de T. gondii et une homologie de 58% à 87% avec Hammondia hammondi ; et peuvent être considérées comme des candidates intéressantes pour le développement d'un test d'immunochromatographie qui peut être utilisé pour le diagnostic rapide de la toxoplasmose et comme test de confirmation lorsque les techniques de routine donnent des résultats équivoques.