Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Différenciation chondrogénique des cellules souches dérivées du tissu adipeux par stimulation électrique par radiofréquence

María Luisa Hernández-Bule, María Ángeles Trillo, María Ángeles Martínez-García, Carlos Abilahoud et Alejandro Úbeda

Objectif : Bien que les thérapies par transfert électrique capacitif-résistif (CRET), basées sur l'application transdermique de courants de radiofréquence électrothermique, aient montré une efficacité thérapeutique prometteuse dans la régénération de lésions tissulaires traumatiques ou dégénératives, leurs effets potentiels sur des tissus comme le cartilage, ayant de faibles capacités de régénération, n'ont pas été suffisamment étudiés. Nous étudions ici les effets de l'exposition à un courant de 448 kHz généralement utilisé dans la thérapie CRET, sur la différenciation chondrogénique précoce des cellules souches humaines dérivées du tissu adipeux (ADSC).

Matériel et méthodes : Les cellules souches obtenues à partir de donneurs sains ont été différenciées en milieu chondrogénique pendant 16 jours. Au cours des 2 derniers jours d'incubation, les cultures ont été exposées de manière intermittente ou simulée à un courant sinusoïdal de 448 kHz, administré à une densité subthermique de 50 μA/mm2 ^. La réponse cellulaire a été évaluée par : test de prolifération XTT, quantification des glycosaminoglycanes (GAG) et du collagène (analyse d'image, test Blyscan et immunoblot) et analyse de l'expression des facteurs chondrogéniques Sox5 et Sox6, et du facteur de transcription ERK1/2 et de sa forme active p-ERK1/2 (immunoflorescence, immunoblot et RT-PCR).

Résultats : Le stimulus électrique a augmenté de manière significative les niveaux de collagène de type II spécifique du cartilage et de GAG ​​dans la matrice extracellulaire des cultures en différenciation. Bien qu'aucun changement n'ait été observé dans l'expression des gènes SOX à la fin du traitement de 48 h, le stimulus a induit une surexpression significative des facteurs de transcription L-Sox5, Sox6 et p-ERK1/2. Étant donné que ces protéines sont des régulateurs cruciaux de la synthèse de la matrice extracellulaire au cours de la différenciation chondrogénique, il est probable que leur surexpression soit impliquée dans les augmentations observées de la teneur en collagène extracellulaire et en GAG.

Conclusion : L'ensemble de données actuel étaye l'hypothèse selon laquelle la composante électrique du traitement électrothermique appliqué dans les thérapies CRET pourrait stimuler la réparation du cartilage en favorisant la différenciation chondrogénique. Ces données, associées aux résultats précédemment rapportés selon lesquels le traitement in vitro avec le même type de signal électrique subthermique favorise la prolifération des ADSC indifférenciées, permettent d'identifier les phénomènes moléculaires sous-jacents aux effets potentiels de réparation et de régénération de ces courants de radiofréquence.