Abstrait

Clonage et expression des domaines C2 et V de la protéine ALCAM dans E. coli BL21 (DE3)

Hassan Dana, Ali Mazraeh, Ghanbar Mahmoodi Chalbatani, Vahid Marmari, Habibollah Mahmoodzadeh, Ali Ghamari, Fateme Moazzen, Mohammad Ebrahimi et Narges Mehmandoost

Introduction : ALCAM en tant que glycoprotéine fait partie de la famille des immunoglobulines et joue un rôle important dans la croissance, la survie et la motilité cellulaire. Cette protéine contribue également au développement de l'invasion tumorale dans les cancers colorectaux et du sein et est généralement considérée comme un marqueur des cellules souches cancéreuses. ALCAM en tant qu'antigène de surface cellulaire, avec une expression élevée dans certains cancers comme le cancer colorectal et le cancer du sein, a le potentiel de diagnostiquer et de traiter ces cancers. Objectifs : Comme d'autres protéines membranaires, ALCAM représente une cible potentielle pour le traitement des cancers colorectaux et du sein. Par conséquent, cette étude vise à cloner et à exprimer les domaines C2 et V à utiliser dans des plans pratiques, diagnostiques et curatifs. Méthodes : Dans cette étude, la séquence des domaines C2 et V a été optimisée pour l'expression dans un hôte procaryote à l'aide d'outils en ligne et clonée dans des plasmides d'expression pET-28a. Les cellules E. coli BL21 (DE3) ont été transformées par des plasmides recombinants pET-28a en utilisant la méthode du choc thermique et l'expression des domaines V et C2 recombinants a été examinée par la technique SDS-PAGE. Résultats : Les gènes synthétiques des domaines C2 et V ont été localisés entre les sites de restriction NcoI/BamHI et XhoI et clonés dans le vecteur pBSK (+). La présence de ces gènes dans pET28a a été déterminée par colonie et confirmée par digestion de restriction. Les gènes des domaines C2 et V ont été exprimés dans E. coli BL21 DE3. Les résultats de la technique SDSPAGE ont confirmé l'expression des domaines C2 et V recombinants de 23 et 29 kDa dans un système d'expression bactérien. Conclusions : Les gènes des domaines C2 et V ont été exprimés sous forme de recombinants dans E. coli. Ces fragments recombinants peuvent être introduits comme candidats diagnostiques et curatifs pour le dépistage et la thérapie du cancer chez les patients atteints de cancers colorectaux et du sein.

Avertissement: Ce résumé a été traduit à l'aide d'outils d'intelligence artificielle et n'a pas encore été examiné ni vérifié