Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

La co-culture de cellules EndoC-βH1 humaines productrices d'insuline avec des cellules souches de la crête neurale à capuchon limite protège partiellement contre la mort cellulaire induite par les cytokines

Anongnad Ngamjariyawat, Svitlana Vasylovska, Kyril Turpaev, Phillippe Ravassard, Nils Welsh, Elena Kozlova et Rikard G Fred

Nous avons récemment observé que la co-culture de cellules bêta de souris et de rat avec des cellules souches de crête neurale de souris (bNCSC) protégeait contre la mort cellulaire bêta induite par les cytokines inflammatoires, probablement via des jonctions cellule-à-cellule médiées directement par la cadhérine. Cependant, il n'a pas été étudié si les cellules bêta humaines peuvent également être protégées par cette stratégie. Si possible, il s'agirait d'une approche importante pour le développement de nouveaux protocoles visant à améliorer les résultats de la transplantation d'îlots chez les patients atteints de diabète de type 1. Le but de cette étude était donc d'étudier l'effet de la co-culture de bNCSC avec des cellules EndoC-βH1 humaines productrices d'insuline sur la mort cellulaire induite par les cytokines. À cette fin, des bNCSC GFP-positives ont été cultivées avec des cellules EndoC-βH1 humaines GFP-négatives en présence des cytokines IL-1γ (50 U/ml) et IFN-γ (1000 U/ml). Les cellules ont ensuite été colorées à l'iodure de propidium et trypsinisées pour une analyse par cytométrie de flux. L'analyse de la fluorescence de l'iodure de propidium dans les cellules GFP-positives et GFP-négatives a révélé que les cellules EndoC-βH1 mouraient dans une moindre mesure lorsqu'elles étaient co-cultivées avec des bNCSC que lorsqu'elles étaient cultivées sans bNCSC. Nous avons également observé que les cellules EndoC-βH1 formaient des jonctions N-cadhérine, mais pas E-cadhérine avec les bNCSC. La population de cellules bNCSC contenait une grande proportion de cellules exprimant la bêta-tubuline, ce qui indique une différenciation neuronale. Une fonction protectrice des jonctions N-cadhérine a été vérifiée par la découverte qu'un anticorps N-cadhérine neutralisant contrecarrait l'effet de la co-culture. Nous concluons que l'interaction entre les cellules productrices d'insuline humaine et les bNCSC entraîne une sensibilité réduite des cellules productrices d'insuline aux cytokines pro-inflammatoires in vitro.