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Abstrait

L'expression constitutive de GFP-UTF1 interfère avec la différenciation des cellules ES et EC

Rajkumar P. Thummer, Loes J. Drenth-Diephuis et Bart JL Eggen

Les cellules souches embryonnaires ont la capacité de s'auto-renouveler et peuvent se différencier en tous les types de cellules des trois lignées germinales embryonnaires. Le gène UTF1 (Transscription Factor 1) des cellules embryonnaires indifférenciées est fortement exprimé dans les cellules ES et nous avons précédemment rapporté que UTF1 est étroitement associé à la chromatine et est nécessaire à la différenciation des cellules souches embryonnaires (ES) et des cellules de carcinome embryonnaire (EC) pluripotentes de souris . Dans cette étude, nous avons généré des lignées cellulaires ES et EC exprimant de manière constitutive GFP-UTF1 pour étudier plus en détail son rôle dans la différenciation. Les cellules ES et EC exprimant de manière constitutive GFP-UTF1 ont été supprimées dans leur prolifération et étaient toujours dépendantes du LIF pour l'auto-renouvellement. La différenciation du corps embryonnaire (EB) des cellules ES surexprimant GFP-UTF1 a montré à la fois une différenciation normale ainsi qu'une différenciation retardée ou incomplète d'un sous-ensemble de cellules. GFP-UTF1 était exprimé de manière persistante dans les cellules indifférenciées tandis que l'expression de GFP-UTF1 n'était pas détectée dans les cellules différenciées. Alors que les cellules ES exprimant GFP-UTF1 se différenciaient normalement en réponse au DMSO, la différenciation des cellules EC était complètement bloquée. Lorsque les cellules ES et EC exprimant GFP-UTF1 étaient traitées avec RA, les marqueurs de différenciation étaient induits et les niveaux de protéines endogènes UTF1 et GFP-UTF1 diminuaient. Cependant, l'ARNm de GFP-UTF1 et UTF1 (dans les cellules ES) était toujours détecté, ce qui indique que la dégradation de la protéine (GFP-)UTF1 a précédé la régulation négative de l'ARNm (GFP-)UTF1, suggérant que RA induisait la dégradation de UTF1. La synthèse de ces données indique que, comme pour la déplétion d'UTF1, la surexpression de GFP-UTF1 interférait avec la différenciation des cellules ES et EC.

Avertissement: Ce résumé a été traduit à l'aide d'outils d'intelligence artificielle et n'a pas encore été examiné ni vérifié