Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

La cryoconservation a un impact sur la fonctionnalité cellulaire des cellules souches dérivées du tissu adipeux développées à long terme

Ali El Othmani, Sabrina Rouam, Anass Abbad, Chaimaa Erraoui, Sara Harriba, Hassan Boukind, Jalal Nourlil, Gabriel Malka et Loubna Mazini

Objectif : Les cellules souches dérivées du tissu adipeux (ADSC) sont des cellules moins immunogènes et ont un profil de sécrétion de cytokines hétérogène, ce qui en fait un meilleur candidat pour l'immunothérapie cellulaire. Même de manière innée ou stimulée, l'interleukine-6 ​​(IL-6) et le récepteur de type Toll 2 (TLR2) sécrétés par les ADSC ont été modulés et ont conduit à différentes voies de mécanismes inflammatoires via la sécrétion de différents facteurs inflammatoires. Ces propriétés peuvent être très utiles dans le traitement des maladies chroniques associées à l'inflammation. Pour être utilisée, l'expansion ex-vivo des ADSC est une question critique avant la transplantation ou la cryoconservation. Des changements cellulaires fonctionnels ont été signalés pendant l'expansion de la culture, susceptibles d'interagir avec les effets de congélation/décongélation, ce qui conduit à douter des résultats thérapeutiques cellulaires. Le but de cette étude est d'identifier l'effet de la congélation/décongélation à différents moments de la culture d'expansion sur la sécrétion d'IL-6 et de TLR2.
Méthodes : Les ADSC ont été prélevées chez de jeunes donneuses, développées en culture et cryoconservées dans du sérum fœtal bovin (FBS) et du diméthylsulfoxyde (DMSO) après chaque passage pendant 6 mois à un an. Les ADSC ont ensuite été testées pour la prolifération, la clonogénicité, l'expression des gènes des cytokines et l'évaluation avant la cryoconservation (frais) et après décongélation et mises en culture jusqu'à la confluence (congelées/décongelées). Les ADSC conservées au passage 0 (P0) ont été décongelées et testées après confluence à P1.
Résultats : Les ADSC cryoconservées en P1 ont entraîné une clonogénicité, une sécrétion totale d'ARN et de protéines accrues par rapport aux ADSC fraîches. La quantification relative (RQ) et l'évaluation des cytokines de l'IL-6, de l'IL-10, du facteur de nécrose tumorale (TNF)-α et du TLR2 ont révélé une régulation positive modérée du TLR2 tandis que des niveaux de sécrétion d'IL-6 significativement plus élevés ont été observés dans les ADSC développées et cryoconservées à long terme.
Conclusion : Nos résultats suggèrent que les ADSC cryoconservées développées à long terme en culture étaient fonctionnellement différentes et pourraient avoir des propriétés immunosuppressives altérées par modulation des réponses inflammatoires par l'activation de l'IL-6 et du TLR2.