Journal de bioéquivalence et de biodisponibilité

Abstrait

Détermination du Fingolimod dans le sang total par LC-MS/MS : application à l'étude de bioéquivalence

Tawfiq Arafate, Ahmed Abu-Awwad, Basil Arafat, Asaad Shahin, Hadil Alotaibi, Mona Bustami

Une nouvelle méthode de chromatographie liquide bioanalytique couplée à la spectrométrie de masse en tandem a été développée et validée pour la détermination clinique du chlorhydrate de fingolimod dans le sang total. La méthode a été appliquée dans une étude de bioéquivalence suivant une conception parallèle ouverte, une dose unique randomisée et deux traitements par des sujets adultes sains de sexe masculin dans des conditions de jeûne. Le fingolimod avec un étalon interne marqué (IS ; Fingolimod-D4) a été extrait du sang humain par extraction liquide-liquide et séparé chromatographiquement de sa matrice par une colonne Fortis UniverSil Cyano. La méthode établie a été validée sur une plage dynamique d'étalonnage de 12 à 1200 pg/ml pour le sang enrichi. Au cours d'une période unique, chaque sujet de 42 volontaires sains a reçu une dose unique de 0,5 mg de gélule de chlorhydrate de fingolimod du produit d'essai ou de référence. Les paramètres pharmacocinétiques de C _max , AUC _0–t et T _max ont été calculés pour le fingolimod dans le sang du produit d'essai et comparés au produit de référence. Le fingolimod et l'IS ont été détectés par un mode de balayage positif de surveillance de réactions multiples (MRM) avec un filtre de masse de m/z 308,4 → 255,3 pour le fingolimod et 312,4 → 259,3 pour l'IS. Tous les résultats de validation étaient conformes aux critères d'acceptation selon la directive européenne relative aux méthodes bioanalytiques. Les résultats actuels de l'ASC _0-72 , de la C _max et du T _max pour Gilenya ^® étaient biocomparables aux paramètres correspondants dérivés du produit testé. La méthode validée a été appliquée avec succès dans une étude de bioéquivalence pour étudier la capsule de figolimod 0,5 mg à partir de sang total humain après une conception de périodes parallèles.