Journal de bactériologie et parasitologie

Abstrait

Développement et test d'échantillons d'essai pour le sérodiagnostic spécifique de Fasciola gigantica via une évaluation externe de la qualité

Vu Quang Huy, Tran Thien Trung, Ha Manh Tuan, Vu Chi Thanh, Le Van Chuong, Nguyen Lam Duc Vu, , Huynh Thi Diem Phuc, Bui Quang Sang

Objectif : Élaborer une procédure de production d’échantillons pour le sérodiagnostic spécifique des anticorps anti- Fasciola gigantica via un système d’évaluation externe de la qualité, et évaluer l’homogénéité et la stabilité des échantillons d’essai.

Méthodes : Dans cette étude expérimentale, des échantillons contenant un anticorps anti- Fasciola gigantica selon un dépistage par ELISA, suivi d'une confirmation par Western blot, ont été collectés. Tous les échantillons ont été testés et se sont révélés négatifs pour d'autres helminthes, en particulier les anticorps anti-trématodes. Les échantillons étaient également négatifs pour les anticorps anti-VIH-1 et -2, les anticorps anti-VHC et l'antigène HBs. Les échantillons ont été préparés par des méthodes de lyophilisation et de congélation, la stabilité et l'homogénéité ont été évaluées toutes les 2, 4, 8, 12 et jusqu'à 24 semaines.

Résultats : Nous avons produit trois lots d'échantillons de sérum contenant des anticorps anti- Fasciola gigantica à trois niveaux. Le lot DK1 avait une densité optique, DO = 0,350 ± 0,037 ; les lots DK3 et DL3 avaient O = 0,653 ± 0,046, et le lot DL1 avait DO = 0,850 ± 0,047 avec une longueur d'onde de 450 nm. Les anticorps IgG spécifiques contre les antigènes de Fasciola gigantica se sont révélés positifs pour les trois protéines, la protéine de 8 à 9 kDa (P 8-9), la protéine de 28 kDa (P 28) et la protéine de 42 kDa (P 42) par la technique de Western blot. Les échantillons d'essai ont été confirmés comme étant homogènes par le test de Fisher (statistique F 0,05) ainsi que comme étant stables pendant 24 semaines (avec statistique t 0,05).

Conclusion : Des échantillons d'essai pour le sérodiagnostic spécifique des anticorps anti- Fasciola gigantica via une évaluation externe de la qualité peuvent être produits avec une homogénéité et une stabilité durant 24 semaines par des méthodes de lyophilisation et de congélation.