Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Développement et validation d'une méthode de chromatographie liquide à haute pression indiquant la stabilité pour la détermination de la prostaglandine E1 et de ses produits de dégradation dans la formulation intracaverneuse de sn

Victoire Vieillard, Ghorbel N, Deffaux C, Astier A, Yiou R et Paul M

Une nouvelle formulation intracaverneuse a été développée pour pallier l'échec des traitements standards de la dysfonction érectile après prostatectomie radicale. Cette formulation contient de la prostaglandine E1 (pGE1) à 15 μg/ml en association avec de la papavérine et de l'urapidil à 15 mg/ml et 2,5 mg/ml respectivement. La pGE1 étant le principal composé à subir une dégradation physico-chimique, sa dégradation et l'apparition concomitante de son produit de dégradation la prostaglandine A1 (pGA1) sont corrélées à la stabilité de la formulation. La faible absorbance spécifique de la PGE1 dans la région ultraviolette et la présence de taux élevés de papavérine et d'urapidil dans la formulation ont été les principales difficultés pour développer une nouvelle méthode de détermination simultanée de pGE1 et de pGA1. De nombreuses compositions et pH de phase mobile ont été étudiés pour trouver les meilleures conditions chromatographiques, et la méthode choisie est une méthode de dosage par chromatographie liquide haute performance en phase inverse (RP-HPLC) sensible, précise et exacte. Français La séparation par RP-HPLC en rampe a été réalisée sur une colonne Kromasil 5 C18 (250 × 4,6 mm de diamètre intérieur, granulométrie de 5 μm) en utilisant une phase mobile composée d'un tampon phosphate d'acétonitrile à pH 3 (37 : 63 %, v/v). La détection a été réalisée à 205 et 230 nm pour PGE1 et pGA1 respectivement, en utilisant un détecteur UV multi-ondes. La méthode a été validée pour la spécificité, la linéarité, la précision, l'exactitude, la robustesse et la sensibilité. Les limites de quantification étaient d'environ 3 μg/ml pour pGE1 et 0,5 μg/ml pour pGA1. La présence d'urapidil et de papavérine à haute concentration n'a pas interféré avec la détermination de pGE1 et pGA1 dans la formulation. La méthode développée qui sépare tous les produits de dégradation les plus formés dans diverses conditions était sensible, sélective, linéaire, précise et exacte, et peut donc être utilisée pour étudier la stabilité de la formulation.