Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Développement et validation de la méthode LC-MS/MS pour la détermination du maléate de trimipramine dans le plasma humain

Venkata Sairam Koganti, Sekuri Shashidhar Reddy, Jyothigoudapura Channabasappa Thejaswini et Gurupadayya Bannimath

Une méthode simple et sensible de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) a été développée pour la détermination du maléate de trimipramine dans le plasma humain en utilisant le dihydrochlorure d'opipramol comme étalon interne (ISTD). L'analyte et l'ISTD ont été isolés du plasma par la méthode de précipitation des protéines en utilisant du méthanol. La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne ZORBAX ECLIPSE XDB-C18 (4,6 x 150 mm, 5 µm). L'élution a été effectuée avec une phase mobile isocratique composée de 5 mM de formiate d'ammonium avec 0,1 % d'acide formique et de méthanol dans un rapport de 25:75 (v/v) à un débit de 1,0 ml/min. La trimipramine et l'opipramol ont été détectés avec des adduits protoniques à m/z 295,20→100,10 et m/z 364,30→171,20 en mode positif de surveillance de réactions multiples (MRM) respectivement. Le temps de rétention de la trimipramine et de l'ISTD s'est avéré être respectivement de 1,67 min et 1,48 min. Les courbes d'étalonnage étaient linéaires sur une plage de concentrations de 0,1 à 100,1 ng/ml. La limite inférieure de quantification s'est avérée être de 0,1 ng/ml. La méthode a été validée par les directives de l'EMEA (Agence européenne des médicaments) pour la linéarité, l'exactitude et la précision, le facteur de matrice, la récupération, la sélectivité et la stabilité. Les paramètres de validation se sont avérés bien dans la limite d'acceptation.