Journal de bactériologie et parasitologie

Abstrait

Développement d'une PCR imbriquée sensible en temps réel pour le diagnostic des phases aiguës et chroniques de la toxoplasmose dans un modèle de souris

Parisa Mousavi, Hossein Mirhendi, Hossein Keshavarz Valian, Saeedeh Shojaee, Shirzad Fallahi, Armin Farhang, Mohammad-Ali Mohaghegh et Rasool Jafari

Toxoplasma gondii est un parasite intracellulaire qui provoque une variété de manifestations cliniques. Les phases aiguës et chroniques de la toxoplasmose sont considérées comme la présence de tachyzoïtes en prolifération active dans les cellules nucléées d'hôtes mammifères tels que l'homme, et se propagent par le sang à d'autres parties du corps, ce qui forme ensuite des kystes tissulaires. La présente étude visait à évaluer la valeur diagnostique de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) imbriquée en temps réel pour les phases aiguës et chroniques de la toxoplasmose chez les souris de laboratoire en comparaison avec la PCR en temps réel conventionnelle. Pour induire une toxoplasmose aiguë, 103 tachyzoïtes de la souche Toxoplasma gondii RH ont été inoculés par voie intrapéritonéale à 25 souris BALB/c. Afin d'induire une toxoplasmose chronique, les souris ont été infectées par voie sous-cutanée par le parasite puis traitées à la sulfadiazine du premier au 14e jour après l'injection. L'ADN génomique a été extrait du sang et des tissus cérébraux. Français Une PCR en temps réel et en temps réel imbriquée ciblant un élément répété (RE) de 529 pb a été réalisée. Toutes les souris atteintes d'une infection aiguë étaient positives pour Toxoplasma gondii en utilisant la PCR en temps réel imbriquée et 21 étaient positives par PCR en temps réel. Dans la phase chronique, tous les échantillons de sang étaient négatifs avec la PCR en temps réel et trois étaient positifs avec la PCR en temps réel imbriquée. Cependant, sur les 25 échantillons cérébraux, 28 %, 52 % et 72 % étaient positifs avec les méthodes microscopiques, PCR en temps réel et PCR en temps réel imbriquée, respectivement. Les résultats de la présente étude ont montré que les méthodes moléculaires ont une sensibilité élevée pour le diagnostic de la toxoplasmose aiguë. Dans la phase chronique, un échantillon de sang n'est pas adapté à la détection de l'infection, et d'autres échantillons de tissus peuvent être utilisés à la place. De plus, la PCR en temps réel imbriquée a une sensibilité encore plus élevée par rapport à la PCR en temps réel conventionnelle.