Ji-Yeon Kim, Sung-Il Kang, Jin Ju Lee, Kichan Lee, So-Ra Sung, Suk Chan Jung, Yong Ho Park, Han-Sang Yoo et Moon Her
Pour diagnostiquer efficacement la brucellose, de nombreuses méthodes de détection spécifiques au genre et à l'espèce basées sur la PCR ont été développées. Avec les tests PCR conventionnels, des techniques de PCR en temps réel ont été développées comme outils de diagnostic rapide. Parmi elles, la PCR en temps réel utilisant une sonde d'hybridation (hybprobe) a été recommandée pour les bactéries présentant une forte homologie d'ADN entre les espèces, avec laquelle il est possible d'établir un diagnostic précis au moyen d'une courbe d'amplification et d'une analyse du pic de fusion. Une hybprobe pour B. abortus a été conçue à partir d'un polymorphisme mononucléotidique (SNP) spécifique sur le gène fbaA. Cette sonde n'a montré une amplification spécifique de B. abortus qu'à partir du 14e cycle environ, étant donné un pic de fusion à 69 °C. La sensibilité de la PCR en temps réel s'est révélée être de 20 fg/μl par dilution d'ADN de 10 fois, et la limite de détection était de 4 UFC dans les échantillons cliniques. Cette PCR en temps réel a montré une sensibilité supérieure à celle de la PCR conventionnelle et de la PCR en temps réel précédente basée sur la sonde Taqman. Par conséquent, ce nouveau test PCR en temps réel pourrait être utile pour différencier l’infection à B. abortus avec rapidité et précision.