Lianna Li, Kierra Jones et Hao Mei
Contexte : Le cancer colorectal (CCR) est le troisième cancer le plus fréquemment diagnostiqué et la deuxième cause de décès liés au cancer aux États-Unis. Les cellules souches cancéreuses (CSC) sont considérées comme la principale cause de récidive du CCR. Un marqueur spécifique des cellules souches, la doublecortine-like kinase 1 (DCLK1), joue un rôle essentiel dans la tumorigenèse et la progression du CCR. La régulation positive de DCLK1 est corrélée à un mauvais pronostic. On ne sait pas si DCLK1 est corrélé à une chimiorésistance accrue des cellules CCR. Nous cherchons à révéler l'association de DCLK1 avec la chimiorésistance des cellules CCR et les mécanismes moléculaires sous-jacents.
Méthodes : Des cellules surexprimant DCLK1 stables (DCLK1+) ont été établies à l'aide des cellules HCT116 (WT). Les cellules DCLK1+ et WT ont été traitées avec du 5-fluorouracile (5-Fu) à différentes doses pendant 24 ou 48 heures. Le test MTT a été utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire et la CI50 du 5-Fu a été déterminée. Une PCR quantitative en temps réel a été appliquée pour déterminer l'expression génique de la caspase-3 (casp-3), de la casp-4 et de la casp-10. L'expression de la casp-3 clivée a été étudiée à l'aide du Western blot et de l'immunofluorescence.
Résultats : Nos résultats ont démontré que la CI50 du 5-Fu pour les cellules DCLK1+ était significativement plus élevée que celle des cellules WT pour les traitements de 24 et 48 heures (p = 0,002 et 0,048 respectivement), indiquant une chimiorésistance accrue des cellules DCLK1+. L'expression génique de casp-3, casp-4 et casp-10 a été significativement inhibée dans les cellules DCLK1+ après traitement au 5-Fu par rapport aux cellules WT (p = 7,616e-08, 1,575e-05 et 5,307e-08, respectivement). La quantité de casp-3 clivée et les cellules positives à casp-3 ont été significativement diminuées dans les cellules DCLK1+ après traitement au 5-Fu par rapport aux cellules WT (p = 0,015).
Conclusions : En conclusion, nos résultats ont démontré que la surexpression de DCLK1 améliorait la chimiorésistance des cellules CCR au traitement au 5-Fu en supprimant l'expression génique des caspases clés de la voie d'apoptose et l'activation de cette voie. DCLK1 peut être une cible thérapeutique intéressante pour le traitement efficace des patients atteints de CCR.