Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Dynamique de la liaison HSP60-Cypd étudiée par résonance plasmonique de surface

Ekaterina A. Korobkova

Objectifs : La liaison de la chaperonine HSP60 à la cyclophiline D (CypD) représente une voie oncogène qui empêche les mitochondries de subir une ouverture de pore de transition de perméabilité (PTP). Ainsi, HSP60 peut être considérée comme une cible intéressante pour la conception d'inhibiteurs chimiques. La complexité de la structure de HSP60 empêche l'utilisation de méthodes de criblage standard. La présente étude visait à analyser la dynamique des interactions de CypD avec différents domaines HSP60. Méthode : La technologie de résonance plasmonique de surface (SPR) a été utilisée. Des anticorps qui se localisent dans diverses régions de HSP60 ont été immobilisés sur une puce de biocapteur CM5 en utilisant la chimie de couplage amino. HSP60 a été attaché à divers anticorps sur la puce, ce qui a donné lieu à différentes orientations de la protéine, et la cinétique de sa liaison à HSP60 a été analysée. Résultats : Les constantes de vitesse de dissociation pour les interactions HSP60-CypD variaient entre 5,5 × 10-4 s-1 et 16 × 10-4 s-1. Les constantes d'équilibre de dissociation variaient de 15,8 nM à 43,5 nM. Un anticorps reconnaissant une région entre les résidus 50 et 100 dans le domaine équatorial de HSP60 a empêché son association avec CypD. Conclusion : La technologie SPR s'est avérée efficace dans l'analyse des interactions entre les sous-unités CypD et HSP60. La force de liaison était comparable à celle d'une liaison anticorps-antigène relativement forte. La liaison préférentielle de CypD à un domaine spécifique dans la sous-unité HSP60 suggère la possibilité de concevoir un antagoniste moléculaire.