Génétique héréditaire : recherche actuelle

Abstrait

Évaluation de la thérapie génique médiée par AAV avec un volume vectoriel réduit chez des souris Cngb3 knockout, un modèle d'achromatopsie

Liu X, Zhang Y, Du W, Shi W, Tao Y, Deng W, Li J, Zhao C, Pang J

Objectif : Cette étude a été conçue pour déterminer si le volume du vecteur utilisé pour l'injection sous-rétinienne peut être réduit pour transfecter la rétine entière de souris C57bl/6J et s'il peut restaurer la fonction des cônes dans un modèle de souris knockout (KO) pour Cngb3.
Méthodes : Les souris C57bl/6J et les souris Cngb3 KO ont reçu une injection sous-rétinienne de 0,5 μL ou 1 μL de vecteur AAV5-smCBAmCherry et de vecteur AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3, respectivement. Des montages rétiniens entiers et des sections congelées ont été préparés à partir des yeux de souris de type sauvage pour évaluer la zone transfectée. Des électrorétinogrammes (ERG) adaptés à l'obscurité et à la lumière ont été enregistrés deux mois après l'injection du vecteur dans les yeux de souris Cngb3 KO.
Résultat : Dans la rétine des souris de type sauvage injectées avec AAV5-smCBA-mCherry, aucune différence n'a été observée entre les volumes d'injection. Des cellules épithéliales pigmentaires rétiniennes (RPE) et des photorécepteurs positifs au mCherry ont été observés sur toute la rétine. Chez les souris KO Cngb3 injectées avec AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3, les souris injectées avec 1 μL ont montré une restauration moyenne de l'ERG photopique plus élevée que les souris injectées avec 0,5 μL. Cependant, les ERG scotopiques étaient plus faibles chez les souris injectées avec 1 μL, ce qui indique que des volumes d'injection plus élevés ont entraîné plus de dommages.
Conclusion : Un volume réduit (0,5 μL) de vecteur a induit moins de dommages. Cependant, des doses plus élevées de vecteur (1 μL) restaurent une fonction ERG plus élevée chez la souris KO Cngb3.