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Abstrait

Evaluation du milieu de culture des kératinocytes humains

Fabiana Regina Xavier Batista, Jussara Rehder et Maria Beatriz Puzzi

Les kératinocytes humains sont nécessaires à l'ingénierie tissulaire de la peau appliquée à la réparation et à la régénération des tissus en vue d'une application clinique. La nécessité d'avoir des concentrations cellulaires élevées dans un court laps de temps lors de la prolifération cellulaire est vitale. La croissance et le maintien de ces cellules impliquent généralement l'utilisation du milieu MCDB 153, qui est complété par des composants d'origine animale, tels que des facteurs de croissance et du sérum bovin fœtal (FBS). L'objectif de ce travail était d'évaluer différentes formulations à base de milieu MCDB 153 pour la prolifération des kératinocytes. Pour cela, plusieurs expériences ont été réalisées pour définir quels suppléments sont importants pour la culture de cellules cutanées en utilisant un plan factoriel 24. Des échantillons de peau ont été obtenus à partir de quatre patients consentants soumis à une dermolipectomie, l' opération de chirurgie plastique. Ces fragments ont été traités avec 0,25% de trypsine-EDTA pendant quatre heures, à 37ºC. De plus, l'épiderme a été séparé du derme, fournissant des cellules cutanées. Français Les cultures par lots ont été réalisées dans des plaques à 6 et 96 puits, en plus des flacons de 25 cm2. Les résultats concernant la croissance cellulaire et le métabolisme ont montré que les kératinocytes étaient complètement développés dans le milieu MCDB 153 contenant de l'insuline (7,5 µg.mL-1), de l'extrait d'hypophyse bovine-BPE (80 µg.mL-1), du facteur de croissance épidermique-EGF (0,08 µg.mL-1), de l'hydrocortisone (0,63 µg.mL-1) et de la glutamine (1 gL-1). D'autre part, les milieux de culture proposés dans le plan expérimental n'ont pas donné lieu à une croissance cellulaire satisfaisante. De plus, bien que la concentration initiale en glucose soit faible dans la plupart des cas, le lactate était fortement produit par les cellules atteignant 1 gL-1.

Avertissement: Ce résumé a été traduit à l'aide d'outils d'intelligence artificielle et n'a pas encore été examiné ni vérifié