Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Expansion de cellules souches dérivées de tissus adipeux humains traitées de manière semi-automatique dans un milieu supplémenté de sérum autologue et d'antioxydants

Li-Yi Sun, Dian-Kun Li, Pao-Jen Chen, Yu-Yu Joyce Ho, Jon-Son Kuo, Ching-Feng Cheng, Kuei-Fang Lee, Yao-Jen Chang et Cheng-Yoong Pang

Objectif : Le tissu adipeux excisé (TAE) est une excellente source de cellules souches dérivées de tissus adipeux (CSD) pour la thérapie cellulaire autologue. Cependant, la technique actuelle d'excision des tissus adipeux avec des ciseaux chirurgicaux conventionnels et l'utilisation d'un milieu de culture contenant du sérum bovin fœtal (SVF) peuvent ne pas être conformes aux directives des bonnes pratiques tissulaires (BTP). Nous avons donc développé un processus semi-automatisé conforme aux directives susmentionnées pour fabriquer des CSD de qualité clinique à partir de petits volumes de TAE. Méthodes : Un processus semi-automatisé a été développé en utilisant un tube disperseur jetable fonctionnant sur un poste de travail de dispersion de tubes pour obtenir une fraction vasculaire stromale (SVF) à partir de TAE. Un milieu de culture supplémenté de sérum autologue humain (SHA) et d'adjuvant de culture de cellules souches mésenchymateuses (MCA) composé de facteur de croissance des fibroblastes basique (bFGF/FGF-2) et d'antioxydants, a été formulé pour développer les CSD à partir de SVF in vitro. Résultats : Le procédé semi-automatisé peut améliorer considérablement le rendement cellulaire et réduire le temps d'opération pour hacher les tissus d'une heure à quelques minutes. La croissance des ADSC était plus lente dans le milieu HAS à 10 % que dans le milieu supplémenté en FBS, mais leur croissance dans le milieu HAS à 10 % contenant du MCA (10 % HAS+MCA) était supérieure aux deux milieux. Le milieu HAS+MCA à 10 % a également favorisé l'adipogenèse, l'ostéogenèse, la chondrogenèse et a augmenté l'expression de CD44, CD73 et des gènes souches dans les ADSC. Conclusion : Notre nouveau procédé semi-automatisé permet un isolement efficace des SVF, et le milieu HAS+MCA à 10 % accélère la croissance des ADSC à partir de petites quantités d'EFT sans perdre leur capacité de différenciation.