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Abstrait
Expression et production d'anticorps polyclonaux contre la protéine d'enveloppe recombinante du virus de la nécrose des bourgeons de l'arachide
Sivaprasad Y, Bhaskara Reddy BV, Sujitha A et Sai Gopal DVR
Une stratégie d'expression génique in vitro a été utilisée pour la production d'un antisérum polyclonal contre la protéine d'enveloppe (CP) du virus de la nécrose des bourgeons de l'arachide (PBNV). Le gène CP du GBNV issu de l'isolat d'arachide a été cloné dans le vecteur d'expression pQE-30UA et transformé dans des cellules d'Escherichia coli (M15). L'expression du gène CP du GBNV a été induite in vitro et la protéine recombinante (~34 KDa) a été purifiée et utilisée pour l'immunisation des lapins afin de produire l'antisérum polyclonal spécifique du GBNV. L'antisérum avait un titre de 1:5000 dans un test ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) indirect et réagissait spécifiquement dans un Western blot. L'antisérum résultant a été utilisé pour développer un test d'immunocapture par transcription inverse-polymérase en chaîne (IC-RT-PCR) et a comparé ses niveaux de sensibilité avec l'ELISA pour la détection des isolats de GBNV. L'antisérum recombinant a détecté avec succès une infection naturelle du GBNV dans des cultures et des mauvaises herbes hôtes d'importance économique du sud de l'Inde