Journal de pathologie végétale et de microbiologie

Abstrait

Formulation d'une nouvelle méthode de stérilisation de surface et de milieux de culture pour l'isolement d'actinomycètes endophytes à partir de plantes médicinales et son activité antibactérienne

Waheeda K et Shyam KV

Français Les actinomycètes endophytes des plantes médicinales ont été rarement signalés par rapport à ceux des sources terrestres et marines. Les présents résultats corrèlent la présence d'actinomycètes endophytes dans les plantes médicinales en les isolant de trois plantes médicinales, à savoir Ocimum basillicum, Withania somnifera et Rauvolfia tetraphylla. Dans le présent travail, la méthode de stérilisation de surface et les milieux ont été standardisés et 32 ​​actinomycètes endophytes ont été isolés de trois plantes médicinales. Nous avons évalué l'efficacité de quatre méthodes de stérilisation de surface différentes et de quatre milieux pour l'isolement des actinomycètes endophytes. La méthode avec de l'hypochlorite de calcium, du carbonate acide de sodium et de l'azoture de sodium (nouvelle méthode) utilisée était plus efficace pour éliminer les micro-organismes épiphytes. Parmi les quatre milieux testés, l'agar-caséine-amidon (SCA) s'est avéré être le meilleur milieu pour l'isolement des actinomycètes endophytes. Nous avons réussi à obtenir une croissance rapide et abondante de la culture pure d'actinomycètes endophytes sur ISP-4 (M) modifié (gélose en solution saline inorganique) en comparaison avec ISP-4 (S) standard. Le test antibactérien préliminaire de tous les isolats a été testé par test de confrontation. Le criblage secondaire des isolats sélectionnés a été testé par test de diffusion sur disque en utilisant un extrait d'acétate d'éthyle qui a montré une activité antibactérienne à large spectre contre les agents pathogènes humains testés. Sur la base des caractères morphologiques et phénotypiques, 12 isolats ont été identifiés comme Streptomyces spp. Parmi les 12 isolats, A3 en tant que représentant a été caractérisé par SEM et identifié par analyse 16SrRNA comme Streptomyces flavoviridis A3WK, il a montré une activité antibactérienne significative contre les agents pathogènes humains testés. Il s'agit du premier rapport d'isolement réussi d'actinomycètes endophytes à partir desdites plantes médicinales, pour l'utilisation d'une méthode de stérilisation de surface nouvellement formulée et d'une nouvelle étude comparative sur le milieu ISP-4.