Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Croissance et différenciation des cellules souches de la pulpe dentaire humaine conservées dans du sérum de veau fœtal, du sérum humain et des milieux de culture sans sérum/sans xénobiotiques

Rashi Khanna-Jain, Sari Vanhatupa, Annukka Vuorinen, George KB Sandor, Riitta Suuronen, Bettina Mannerstrom et Susanna Miettinen

Introduction : Les cellules souches de la pulpe dentaire (DPSC) sont une source cellulaire accessible avec une applicabilité thérapeutique dans la régénération des tissus endommagés. Les techniques actuelles d'expansion des DPSC nécessitent l'utilisation de sérum bovin fœtal (FBS). Cependant, les réactifs d'origine animale posent des problèmes de sécurité dans le traitement clinique. En développant les DPSC dans un milieu sans sérum/xéno-exempt (SF/XF-M) ou dans un milieu contenant du sérum humain (HS-M), les problèmes peuvent être éliminés. Par conséquent, le but de notre étude était d'identifier des alternatives de milieux de culture cellulaire appropriés pour les DPSC.

Méthodes : Nous avons étudié l'isolement, la prolifération, la morphologie, les marqueurs de surface cellulaire (CD29, CD44, CD90,
CD105, CD31, CD45 et CD146), l'expression des marqueurs de souche (Oct3/4, Sox2, Nanog et SSEA-4) et la différenciation multilignée in vitro des DPSC dans HS-M ou SF/XF-M par rapport au FBS-M.

Résultats : Les DPSC exprimaient les marqueurs de surface cellulaire et de souche dans toutes les conditions étudiées. L'analyse de la prolifération des cellules cultivées dans différentes concentrations de HS a révélé que les cellules isolées dans 20 % de HS-M et passées dans 10 % ou 15 % de HS-M favorisaient la croissance cellulaire. L'isolement direct des cellules dans SF/XF-M n'a pas favorisé la prolifération cellulaire. Par conséquent, les cellules cultivées dans 20 % de HS-M ont été utilisées pour d'autres études SF/XF-M. Cependant, la prolifération des DPSC était significativement plus faible dans SF/XF-M par rapport aux cellules cultivées dans FBS-M et HS-M. De plus, la prolifération des DPSC dans SF/XF-M pourrait être améliorée par l'ajout de 1 % de HS dans le milieu de culture cellulaire. Il y avait des différences dans l'efficacité de la différenciation ostéogénique, chondrogénique et adipogénique entre les cellules cultivées dans les milieux de différenciation FBS, HS et SF/XF. Une différenciation adipogénique et ostéogénique plus prononcée a été observée dans le milieu de différenciation HS, cependant, dans les cellules cultivées FBS-M, une différenciation chondrogénique plus efficace a été détectée.

Conclusions : Nos résultats indiquent que HS est une alternative appropriée au FBS pour l'expansion des DPSC. La composition de SF/XF-M doit être encore optimisée en termes d'extensibilité cellulaire et d'efficacité de différenciation pour atteindre l'applicabilité clinique.