Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Lignes directrices pour optimiser les capacités de survie et de migration des cellules souches mésenchymateuses équines

Sarah Broeckx, Cynthia de Vries, Marc Suls, Deborah J Guest et Jan H Spaas

Contexte : Bien que la thérapie par cellules souches mésenchymateuses (CSM) soit couramment utilisée en médecine vétérinaire , aucune directive spécifique n'est décrite pour garantir une survie et une migration cellulaire optimales. Cependant, cela est indispensable pour assurer une utilisation clinique optimale. Méthodes : Dans la présente étude, des CSM dérivées du sang périphérique équin (SP) ont été isolées et caractérisées. Afin de déterminer les paramètres optimaux pour la cryoconservation à long terme , les effets de différentes concentrations de diméthyl sulfoxyde (DMSO) (5-20 %) et méthodes de décongélation (à température contrôlée ou décongélation manuelle) sur la viabilité des CSM ont été évalués au moyen d'une coloration au bleu trypan. Ensuite, le stockage des CSM a été évalué pendant 12 mois en utilisant seulement 10 % de DMSO comme cryoprotecteur sans congélation à vitesse contrôlée. Ensuite, l'influence des anesthésiques et des gels injectables fréquemment utilisés sur la viabilité des CSM a été évaluée. Enfin, la capacité de migration des CSM à travers l'acide hyaluronique à différentes concentrations a été évaluée. Résultats : Nous avons d'abord démontré que la concentration en DMSO et la méthode de décongélation n'avaient pas d'influence notable sur la viabilité des CSM dans les 4 heures suivant la décongélation. Ensuite, les anesthésiques étaient hautement cytotoxiques et seulement 10 % des CSM survivaient 3 heures après leur présence. Les gels à base d'acide hyaluronique et de glycosaminoglycanes étaient compatibles avec les CSM et permettaient une survie cellulaire élevée (plus de 90 %) dans les 48 heures suivant le suivi. Cependant, dans un gel de polyacrylamide, environ 80 % des CSM mouraient dans les 48 heures. Enfin, la concentration du gel influençait la capacité de migration des CSM. En effet, seulement 60 % des CSM dans 20 mg/ml d' acide hyaluronique se fixaient à la surface sous-jacente dans les 48 heures, alors que près de 100 % des CSM dans 10 mg/ml de la même substance étaient capables de migrer à travers le gel. Conclusion : La présente étude présente des lignes directrices pratiques pour l’application clinique des MSC dérivées du PB équin.