Journal of Pharmacogenomics & Pharmacoproteomics

Abstrait

Échelle d'ADN de 100 paires de bases fabriquée maison à partir du plasmide bactérien pMAL-C2X

Firuzeh Badreh1, Khodakaram Jahanbin2, Ali Khodadadi2, Ali Khorasani Zadeh2, Moosa Sharifat2, Milad Khayati2, Mohammad Rashno2,3

Contexte : La plupart des résultats de recherche en biologie moléculaire nécessitent des marqueurs tels que des échelles d’ADN pour détecter et quantifier la longueur des fragments d’acide nucléique par électrophorèse dans le cadre de tâches de routine.

Méthodes : Dans cette étude, nous présentons une méthode de préparation d'une échelle d'ADN de 100 paires de bases basée sur la technique de PCR. Le plasmide bactérien pMAL-C2X a été utilisé comme ADN modèle dans la PCR. Les produits de PCR ont été extraits par phénol/chloroforme, précipités avec de l'éthanol et mélangés proportionnellement.

Résultats : Finalement, un ensemble de 7 amorces (5 reverse et 2 forward) a été conçu avec succès. Les fragments PCR amplifiés ont été quantifiés par nanodrop et la taille des bandes a été estimée par électrophorèse sur gel avec une échelle commerciale comigrante de 100 pb dans un gel d'agarose à 1,5 %. Les résultats ont indiqué que les bandes claires et nettes de 100 pb à 1000 pb ont été générées avec succès par une réaction en PCR.

Conclusion : Notre produit fait maison est un produit compétitif avec un marché commercial et peut être préparé avec une méthode simple et peu coûteuse et une faible probabilité de bande non spécifique.