Journal of Aquaculture Research & Development

Abstrait

Identification et utilisation efficace des antibiotiques pour le développement d'un système de transformation stable chez Porphyra yezoensis (Bangiales, Rhodophyta)

Megumu Takahashi, Koji Mikami, Hiroyuki Mizuta et Naotsune Saga

Malgré le développement de l'expression transitoire des gènes dans les algues rouges Porphyra, un système de transformation stable n'a pas encore été établi dans ces algues. L'une des raisons de la difficulté de la transformation est l'absence de moyen de sélectionner les cellules transformées à partir des algues. Ainsi, pour identifier les antibiotiques adaptés à la sélection des cellules transformées de manière stable, nous avons testé la sensibilité du gamétophyte à 6 antibiotiques, l'ampicilline (Am), la kanamycine (Km), l'hygromycine (Hm), la généticine (G418), le chloramphénicol (Cm) et la paromomycine (Pm), qui sont fréquemment utilisés comme agents de sélection dans la transformation des plantes terrestres et des microalgues. Français Des tests de sensibilité, qui ont été réalisés avec différentes concentrations (0-10 mg·mL-1) d'antibiotiques, ont montré que Hm, G418, Cm et Pm présentaient un effet létal à plus de 1,0 mg·mL-1, suggérant l'adéquation de ces quatre antibiotiques pour la sélection de cellules génétiquement transformées à partir de gamétophytes de P. yezoensis, tandis que les gamétophytes de P. yezoensis étaient très résistants à Am et Km. Nous avons également réussi à réduire les concentrations d'antibiotiques en abaissant la valeur du pH et la concentration en sel à l'aide d'un milieu synthétique artificiel. L'augmentation de la sensibilité des cellules gamétophytes à Hm, G418, Cm et Pm dans le milieu synthétique modifié contribuera à l'établissement d'un système de transformation génétique chez P. yezoensis.