Journal of Biomolecular Research & Therapeutics

Abstrait

Caractérisation immunochimique de la séquence spécifique de la protéine URG7

Ostuni A, Cuviello F, Salvia AM, D'Auria F, Statuto T, Di Nardoc E, Miglionico R, Carrettad V, Musto P et Bisaccia F

URG7 est une protéine anti-apoptotique constituée de 99 résidus d'acides aminés régulés positivement par l'antigène x lors de l'infection par le VHB. Les 74 premiers acides aminés sont identiques à ceux de la protéine de résistance multiple aux médicaments 6 (MRP6), tandis que les résidus d'acides aminés de 75 à 99 sont spécifiques de la protéine URG7. Des outils immuno-informatiques et une analyse de structure secondaire ont été réalisés pour identifier les propriétés antigéniques de cette séquence URG7. Le peptide 75-99 a été synthétisé par la méthode en phase solide, caractérisé structurellement par spectroscopie CD et conjugué à une protéine porteuse. Des lapins blancs de Nouvelle-Zélande ont été immunisés et les sérums ont été testés pour les anticorps spécifiques anti-peptide par analyse ELISA et Western blot. Enfin, un test ELISA avec des sérums humains a été réalisé.

Les lapins immunisés avec le peptide 75-99 produisent des anticorps qui reconnaissent à la fois le peptide 75-99 et le polypeptide recombinant URG7. De plus, les deux antigènes ont permis la détection des anticorps anti-URG7 dans les sérums de sujets sains et infectés par le VHB, bien qu'avec un seuil discriminant différent. Nos données suggèrent que le test ELISA peptidique contre la séquence spécifique de la protéine URG7 permet avec une bonne sensibilité et spécificité la détection des anticorps anti-URG7 dans les sérums de patients infectés par le VHB.