Journal de la technologie microbienne et biochimique

Abstrait

Essais améliorés pour identifier les effets des antibiotiques sur les bactéries planctoniques et sessiles en utilisant l'exemple du 1,8-cinéol

Brotzmann V, Schuermann M, Kaltschmidt B, Kaltschmidt C et Sudhoff H

Le criblage des substances antibiotiques est une étape de travail obligatoire lors du développement de médicaments. Une variété de méthodes sont disponibles pour tester leur efficacité, elles peuvent être divisées en méthodes de diffusion et de dilution. Les méthodes de diffusion dans des milieux à base d'agar sont des approches plutôt qualitatives, tandis que les méthodes de dilution, généralement exécutées dans des plaques de microtitration en polystyrène, sont fréquemment utilisées pour déterminer la concentration minimale inhibitrice (CMI) et la concentration minimale inhibitrice du biofilm (MBIC50) de manière quantitative. Au cours de ces tests standardisés, les propriétés physiques de l'agent, par exemple ses propriétés hydrophobes et son instabilité thermique, sont souvent négligées. Cette étude compare différents tests de diffusion pour leur sensibilité et des tests de dilution améliorés en ce qui concerne la sensibilité thermique et le caractère hydrophobe des antibiotiques. Nous avons appliqué le 1,8-cinéol, un composant antibactérien hydrophobe des huiles essentielles, sur le pathogène Staphylococcus aureus et avons étudié l'influence du temps d'incubation, des récipients de culture cellulaire et des tensioactifs couramment utilisés sur le test. L'étude présentée décrit un essai de diffusion optimisé et un protocole pour la détermination exacte de la CMI et de la MBIC50 de substances antibiotiques hydrophobes thermiquement instables. Nos essais peuvent être facilement exécutés car ils sont basés sur des mesures de densité optique et une simple coloration au cristal violet. Nous concluons que les criblages préliminaires de substances hydrophobes peuvent être effectués par la méthode de diffusion en puits. Cependant, pour la détermination de la CMI et de la MBIC50, nous recommandons fortement l'utilisation de tubes en verre nettoyés et gravés au lieu de plaques de culture cellulaire en polystyrène. L'utilisation des tensioactifs Tween 80 ou Tween 20 s'est avérée inutile et a en outre faussé les résultats. Prises ensemble, nos techniques standard améliorées peuvent aider à mieux quantifier le potentiel antimicrobien des antibiotiques hydrophobes, par exemple les huiles essentielles. Cela peut donner de nouvelles perspectives sur le mode d'action et permettre en outre le développement de nouvelles substances antimicrobiennes dont on a un besoin urgent pour lutter contre les résistances aux antibiotiques courants.