Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Influence de l'âge du donneur et du nombre de passages sur l'activité angiogénique dans les milieux conditionnés à base de cellules souches dérivées de tissus adipeux humains

Takahiro Nakamura, Tomohiko Kazama, Yuki Nagaoka, Yasuji Inamo, Hideo Mugishima, Shori Takahashi et Taro Matsumoto

Introduction : Les cellules souches/stromales dérivées du tissu adipeux (ASC) sont considérées comme une source cellulaire prometteuse pour l'angiogenèse thérapeutique, car elles peuvent être préparées à la suite d'une procédure peu invasive et parce qu'elles sécrètent une variété de cytokines angiogéniques. Dans la présente étude, l'influence de l'âge du donneur et du nombre de passages sur l'activité angiogénique des milieux conditionnés par les ASC (ASC-CM) a été examinée.
Méthodes : Des ASC humaines (âge du donneur, 5 mois à 82 ans ; n = 10) ont été mises en culture et des ASC-CM ont été prélevées aux passages 2, 4 et 6. L'activité angiogénique des ASC-CM a été évaluée à l'aide du test de formation de tube en utilisant un système dans lequel des cellules endothéliales de veine ombilicale humaine (HUVEC) et des fibroblastes ont été co-cultivés. Français Les concentrations de facteur de croissance endothélial vasculaire-A (VEGF-A) et de facteur de croissance hépatocytaire (HGF) dans chaque ASC-CM ont été mesurées à l'aide d'un test immuno-enzymatique.
Résultats : L'âge du donneur supérieur à 60 ans a affecté la capacité proliférative des ASC au passage 4 et plus tard. L'ASCCM a significativement amélioré la formation de tubes HUVEC, et cette réponse n'a pas été influencée par l'âge du donneur. L'ASC-CM au passage 6 a montré une capacité de formation de tubes inférieure par rapport à l'ASC-CM au passage 4, bien que la capacité soit toujours équivalente au contrôle positif (milieu contenant 10 ng/mL de VEGF-A). L'âge du donneur supérieur à 26 ans a affecté le VEGF-A mais pas les niveaux de HGF dans l'ASC-CM, bien que nous n'ayons trouvé aucune corrélation directe entre les niveaux de VEGF-A/HGF et la capacité de formation de tubes.
Conclusion : Nos résultats démontrent une diminution dépendante du nombre de passages mais indépendante de l'âge du donneur de l'activité angiogénique de l'ASC-CM.