Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Isolement et caractérisation de cellules souches de disques intervertébraux adultes à partir de tissus sains de disques intervertébraux humains

Christopher Duntsch, Erika Dillard et Umar Akbar

Ce rapport détaille l'isolement, la culture et la caractérisation des cellules souches du disque vertébral dérivées d'échantillons de tissu du disque vertébral adulte humain. En utilisant des méthodes de culture en suspension de cellules souches et la biologie, les cellules souches du disque vertébral adulte humain ont été isolées et cultivées de manière monoclonale dans des amas multicellulaires de type sphérique (discosphères). Les discosphères de la première série de culture ont été collectées, traitées et réétalées en tant que cellules souches uniques pour des études d'expansion en série utilisant une culture en suspension, démontrant qu'une expansion linéaire était possible. Les discosphères et les cellules souches du disque vertébral adulte ont été plaquées sur des surfaces de culture recouvertes de matrice dans des milieux de cellules souches pendant plusieurs heures pour permettre la fixation, et analysées pour les biomarqueurs de cellules souches. Les discosphères et les cellules souches du disque vertébral adulte ont été plaquées sur des surfaces de culture recouvertes de laminine dans des milieux chondrogéniques et des conditions de culture pendant 14 jours pour les différencier en cellules NP. Les cellules NP cultivées à partir de ces expériences ont démontré une morphologie et un phénotype NP ; l'expression de biomarqueurs NP, la sécrétion de matrice extracellulaire et la capacité d'être passées en série avec une expansion de volume important possible. Des études d'ingénierie tissulaire utilisant le « test cinétique en rafale » ont démontré que les discosphères possèdent une biologie intrinsèque remarquable de développement et d'ingénierie tissulaire, robuste et organisée. En résumé, des cellules souches discales adultes et des cellules NP ont été isolées, cultivées et caractérisées à partir de tissus sains de disques intervertébraux. Ces résultats démontrent le potentiel important à explorer pour l'utilisation de l'ingénierie tissulaire basée sur les cellules souches pour le traitement de la discopathie dégénérative (DDD).