Journal de la technologie microbienne et biochimique

Abstrait

Isolement et purification de la L-asparaginase à haute efficacité par électrophorèse SDS PAGE préparative quantitative à élution continue

Senthil Kumar M et Selvam K

Une L-asparaginase extracellulaire unique exempte de glutaminase provenant de nouveaux actinomycètes marins a été isolée avec une homogénéité perceptible dans les déchets agro-industriels. L'électrophorèse SDS PAGE préparative quantitative à élution continue est une méthode à haute résolution pour l'isolement préparatif de la L-asparaginase dans des échantillons biologiques. L'enzyme a été purifiée 248,68 fois et a montré une activité spécifique finale de 5035,28 UI/mg avec un rendement de 80,71 %. L'enzyme homotétramère a une masse moléculaire de 133,25 kDa et un point isoélectrique d'environ 5,4. Les paramètres cinétiques, Km et Vmax de la L-asparaginase purifiée de Streptomyces radiopugnans MS1 se sont avérés être respectivement de 0,0598, 3,5478 UI μg - 1. La stratégie de séquençage de novo présentée ici fournit un moyen rapide et fiable d'identifier les protéines dans Streptomyces radiopugnans MS1. La L-asparaginase purifiée n'a pas d'activité glutaminase, ce qui peut diminuer la marge de manœuvre des effets secondaires au cours du traitement anti-malignité.