Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Expansion clinique à grande échelle de cellules souches mésenchymateuses dans le système d'expansion cellulaire Quantum® automatisé, fermé et conforme aux BPF : comparaison avec l'expansion dans des flacons T traditionnels

Chantal Lechanteur, Stefano Baila, Michiel Etienne Janssens, Olivier Giet, Alexandra Briquet, Etienne Baudoux et Yves Beguin

Objectifs : Des avancées significatives ont été réalisées concernant la connaissance des propriétés immunorégulatrices des cellules souches mésenchymateuses (CSM). Nous sommes actuellement impliqués dans plusieurs protocoles cliniques évaluant ces propriétés dans différents contextes, notamment les cellules hématopoïétiques ou la transplantation d'organes solides, et les maladies auto-immunes sévères ou réfractaires. Considérant le grand nombre de cellules expansées ex vivo nécessaires à ces protocoles cliniques (la dose de CSM varie de 1 à 4x10-6 CSM/kg de patient par perfusion), nous avons évalué le dispositif Quantum®, un système de bioréacteur à fibres creuses automatisé, fonctionnellement fermé et conforme aux BPF, et l'avons comparé à notre système de culture clinique traditionnel en flacons. Méthodes : Des expansions de CSM primaires et pré-enrichies ont été réalisées simultanément dans les deux systèmes de culture et évaluées en termes de taux d'expansion et de conformité aux spécifications de qualité et aux critères de libération de l'ISCT. En raison de considérations pratiques, la plupart des expériences menées dans le bioréacteur (expansions P1 et P2) ont utilisé des CSM décongelées. Français Celles-ci ont été comparées aux expansions de MSC fraîches et décongelées dans des flacons. Résultats : Le dispositif Quantum® a produit de manière reproductible des doses thérapeutiques de MSC qui répondent aux critères de libération de l'ISCT, sont stériles, dépourvues de mycoplasmes et d'endotoxines, ont des caryotypes normaux et démontrent des capacités immunosuppressives et de différenciation in vitro. Les cellules ont également poussé plus rapidement dans le bioréacteur que dans les flacons pendant le passage P1 (temps de doublement de 40 heures par rapport à 56 heures dans les flacons) et les expansions P2, mais pas pendant la phase d'expansion primaire (P0). L'ensemencement de 20x10-6 cellules présélectionnées P2 décongelées sur le dispositif nous a permis de récolter 110-276x10-6 MSC après une expansion de 7 jours ; l'ensemencement de 50x10-6 cellules a donné lieu à la récolte de 291-334x10-6 MSC. Conclusion : En conclusion, le dispositif Quantum® est un excellent système pour produire une dose clinique de MSC, mais la rentabilité varie en fonction de la stratégie de fabrication mise en place. Dans notre cas particulier, l'utilisation du dispositif Quantum n'a pas permis de réaliser des économies.