Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Culture à long terme de cellules souches spermatogoniales positives au gène SSEA-4 humain (SSC)

Mari Kokkinaki, Ardalan Djourabtchi et Nady Golestaneh

Récemment, nous et deux autres groupes avons montré que les cellules souches spermatogoniales humaines (SSC) ont le potentiel de devenir pluripotentes in vitro dans des conditions de culture définies et de se différencier en cellules des trois feuillets germinaux embryonnaires. Cette découverte pourrait ouvrir de nouvelles voies pour la thérapie cellulaire autologue dans les maladies dégénératives , en contournant les problèmes éthiques et immunologiques liés aux cellules souches embryonnaires humaines. De plus, les SSC humaines pourraient être utilisées pour traiter l'infertilité chez les enfants survivants du cancer. Cependant, afin de reprogrammer les SSC en pluripotence, ou de les préserver pour la repopulation des testicules infertiles, la première étape, et la plus limitante, est d'avoir accès à une population de SSC humaines hautement purifiées qui pourraient être multipliées et cultivées efficacement in vitro en conservant leurs caractéristiques moléculaires et cellulaires. Bien que diverses études aient tenté d'identifier des marqueurs moléculaires des SSC humaines, à ce jour, il existe encore peu d'informations relatives aux marqueurs spécifiques qui pourraient être utilisés pour leur isolement et leur purification optimisée qui permet la culture in vitro à long terme de SSC humaines isolées. En utilisant ici SSEA-4 comme marqueur optimal pour l'isolement d'une sous-population de SSC, nous montrons que les cellules SSEA-4 positives expriment le niveau le plus élevé de gènes SSC par rapport aux autres sous-populations isolées avec différents marqueurs, et peuvent être maintenues en culture pendant plus de 14 passages, ce que nous n'avons pas pu obtenir avec d'autres marqueurs SSC, notamment GPR125 et ITGA6. De plus, nous avons mis au point une nouvelle technologie de tri cellulaire et de culture à long terme de cellules humaines SSC-SSEA-4 positives qui maximise la pureté et la viabilité des cellules triées. Nos résultats sont cruciaux et pourraient être utilisés pour l'isolement, la purification et la culture à long terme les plus efficaces des SSC pour des applications cliniques en médecine régénérative, ou pour la préparation de SSC humaines pour le traitement autologue de l'infertilité chez les enfants survivants du cancer.