Journal of Carcinogenesis & Mutagenesis

Abstrait

L'expression de la L-plastine dans les cellules colorectales HCT 116 augmente la migration et les ROS de manière dépendante de la NADPH oxydase

Eilis Foran, Michael Freeley, Aideen Long

Objectif : La L-plastine est une protéine de liaison d'action normalement exprimée dans les cellules d'origine hématopoïétique mais qui est également associée à la transformation maligne. L'expression aberrante de la L-plastine est corrélée au stade tumoral dans les cancers colorectaux, et l'expression ectopique de la L-plastine dans les lignées cellulaires du cancer du côlon augmente la prolifération et la migration. La L-plastine est phosphorylée de manière inductible sur Ser ⁵ en réponse à une gamme de stimuli mais le rôle de la L-plastine phosphorylée dans les cellules du cancer du côlon n'a pas été caractérisé. Le but de cette étude était d'analyser l'effet de la phosphorylation de la L-plastine Ser ⁵ sur la prolifération et la migration des cellules du cancer du côlon HCT 116.

Méthodes : La L-plastine de type sauvage ou un mutant de L-plastine Ser ⁵ où la sérine a été échangée contre une alanine non phosphorylable a été exprimé dans les cellules HCT 116. La prolifération cellulaire a été évaluée par comptage cellulaire et activation de la cycline D. La migration cellulaire a été évaluée à l'aide de tests de migration transwell.

Résultats : Nous avons constaté que la L-plastine de type sauvage était constitutivement phosphorylée sur Ser ⁵ lorsqu'elle était exprimée dans les cellules HCT 116 et favorisait un taux de prolifération accru de ces cellules. Les cellules HCT 116 exprimant de manière stable la L-plastine de type sauvage augmentaient également la capacité migratoire de ces cellules ainsi que les niveaux accrus d'espèces réactives de l'oxygène. Les NADPH oxydases sont les principales sources intracellulaires d'espèces réactives de l'oxygène et l'inhibition de l'activité de la NADPH oxydase avec l'inhibiteur pharmacologique DPI a diminué la migration de ces cellules. Il est intéressant de noter que l'expression d'un mutant de L-plastine avec une alanine non phosphorylable à la place de Ser ⁵ n'a pas favorisé une prolifération cellulaire accrue, indiquant que la phosphorylation est nécessaire à ce processus. En revanche, la migration cellulaire et la production de ROS étaient indépendantes de l'état de phosphorylation de Ser ⁵ .

Conclusion : Ces données démontrent que l’expression de la L-plastine dans les cellules cancéreuses du côlon HCT 116 augmente la migration d’une manière qui dépend de la NADPH oxydase mais indépendamment de l’état de phosphorylation de Ser ⁵ .