Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Les souris déficientes en GTPase Rap1A présentent une adhérence réduite des cellules stromales hématopoïétiques et mésenchymateuses, mais un potentiel de repeuplement hématopoïétique intact

Erika Fleck, Stephan Göttig, Harald Kropshofer, Juliane Steinmann, Annette Dorn, Brigitte Rüster, Erhard Seifried, Jürgen Scheele et Reinhard Henschler

Contexte : La guanine triphosphatase (GTPase) Rap1A est impliquée dans la prolifération et la migration cellulaires dans différents tissus. Son rôle dans la production, l'adhésion et la migration des cellules hématopoïétiques dérivées de la moelle osseuse n'est cependant pas complètement compris. Méthodes : Nous avons analysé des souris dépourvues d'un ou des deux allèles Rap1A et mesuré leur fonction d'adhésion et leur capacité de repeuplement hématopoïétique en utilisant une transplantation de moelle osseuse compétitive dans le modèle de transplantation CD45.1/CD45.2. Nous avons également utilisé la cytométrie de flux et des tests d'adhésion en chambre à flux dépendants de la contrainte de cisaillement pour la caractérisation phénotypique et l'analyse des fonctions d'adhésion. Résultats : Les souris Rap1A-/- ont montré une diminution du nombre de lymphocytes et de progéniteurs formant des colonies hématopoïétiques dans le sang, tandis que le nombre de granulocytes, de monocytes ou de plaquettes n'a pas été significativement modifié par rapport aux témoins. L'adhésion induite par la chimiokine CXCL12 de cellules de moelle osseuse dépourvues de marqueurs de lignée (Lin-) à la molécule d'adhésion cellulaire vasculaire (VCAM)-1 et à la molécule d'adhésion intercellulaire (ICAM)-1 a été significativement réduite chez les souris Rap1A-/-. Cependant, la repopulation compétitive par des cellules de moelle osseuse déficientes en Rap1A n'était pas inférieure à celle de la moelle osseuse de type sauvage 9 mois après la transplantation. Aucune croissance de cellules stromales mésenchymateuses (MSC) n'a été observée à partir de la moelle osseuse de souris Rap1A-/-, tandis que les MSC Rap1A+/- présentaient une expression réduite des molécules d'adhésion impliquées dans le retour des progéniteurs et une adhésion altérée aux cellules endothéliales primaires et à VCAM-1 sous contrainte de cisaillement in vitro, par rapport à leurs homologues de type sauvage. Conclusions : Rap1A régule l'adhésion des cellules hématopoïétiques immatures et des cellules stromales mésenchymateuses, mais semble être redondant pour la greffe hématopoïétique.