Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Méthode chromatographique sur colonne multidimensionnelle avec détection UV pour la détermination du propranolol à des niveaux thérapeutiques dans le plasma humain

Kamal A. al-Sagar et Malcolm R. Smyth

Une méthode de dosage HPLC simple et rapide pour l'estimation du propranolol (InderalR) dans le plasma humain a été développée et validée. La méthode élimine totalement la procédure d'extraction ; le nettoyage de l'échantillon a été réalisé par extraction en ligne en phase solide. La séparation a été réalisée avec une colonne μBondapack 10 μm C18 (octadécylsilane, 30 cm × 3,9 mm). La phase mobile était constituée d'un mélange d'eau, de méthanol, d'acétonitrile, d'acide acétique et de triéthylamine dans la proportion de 160 ml : 80 ml : 70 ml : 2,5 ml : 125 μl, respectivement. Le pH a été ajusté à 3,4 à l'aide de NaOH 1 N avant l'ajout de triéthylamine. La phase mobile a été filtrée (filtre de 0,2 μm) et dégazée dans un bain à ultrasons. Le débit de phase mobile était de 0,5 ml/min. La détection a été effectuée par un détecteur UV à 291 nm et le temps de rétention (RT) observé à environ 8 minutes. La récupération du médicament à partir du plasma a été évaluée en comparant la hauteur du pic des échantillons de plasma extraits avec la hauteur du pic des étalons authentiques (non extraits) qui ont été directement injectés (c'est-à-dire sans commutation de colonne) dans la colonne analytique à ces niveaux de concentration. Les valeurs de récupération ont montré des différences inférieures à 4,0 % entre la quantité ajoutée et la quantité trouvée, et étaient indépendantes de la concentration. La réponse était linéaire sur une plage de 20 à 100 ng/ml avec une limite de détection de 1 ng/ml et une limite de quantification à 8 ng/ml de plasma. Cette limite de quantification est adéquate pour l'analyse clinique et les études pharmacothérapeutiques et comparable aux valeurs obtenues par d'autres chercheurs. La même méthode a été utilisée pour l'étude de biodisponibilité de la formulation de propranolol chez des volontaires sains, humains et masculins.