Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

Croissance neuronale et gliale dans les cultures organotypiques après vitrification

Arav Amir, Shahar Abraham, Ziv-Polat Ofra, Natan Yehudit et Patrizio Pasquale

Des tranches de ganglions de la racine dorsale (DRG) et de moelle épinière (SC) de fœtus de rat ont été vitrifiées dans un nouveau système de vitrification semi-automatique, refroidies dans de l'air liquide stérile (SLA) et stockées dans un récipient spécial scellé stérile dans de l'azote liquide (LN). Après réchauffement, des cultures stationnaires organotypiques ont été réalisées en utilisant du gel NVR (composé principalement d'acide hyaluronique et de laminine) et enrichies de facteurs neuronaux conjugués à des nanoparticules d'oxyde de fer. L'évaluation des cultures a été effectuée par des observations quotidiennes au microscope à contraste de phase et par une coloration immunofluorescente.
Les résultats ont révélé que les neurones SC ont conservé leur forme multipolaire et ont fait repousser les dendrites et les axones. Les neurones DRG de forme ronde présentaient des noyaux euchromatiques avec des nucléoles proéminents et une régénération active des processus nerveux. La migration des neurones et des cellules plates (fibroblastes et cellules gliales de Schwann) a commencé dans les 48 heures suivant l'ensemencement et s'est intensifiée dans les jours suivants.
En conclusion, on peut dire que l'utilisation de la vitrification semi-automatique, de la vitrification stérile et du stockage stérile des tissus neuronaux du SNC et du SNP est une technologie avancée réussie pour la préservation des neurones et des cellules gliales, comme le montre la récupération d'un modèle de croissance entièrement régulier en culture. Cela peut constituer une étape importante vers une utilisation clinique dans la reconstruction des nerfs périphériques graves et des lésions de la moelle épinière.