Journal de bactériologie et parasitologie

Abstrait

Production et caractérisation de l'enzyme staphylokinase à partir de Staphylococcusaureus ASIA4

Nourah Hassan Alzahrani, Fareed Shawky El-Shenawy*

Six souches cliniques de Staphylococcus aureus isolées à partir de différents échantillons cliniques. Les isolats ASIA1 et ASIA2 ont été isolés à partir d'échantillons d'urine de patients infectés des voies urinaires ; ASIA3 a été isolé à partir d'échantillons d'écouvillonnage de patients atteints d'abcès brûlés à l'hôpital universitaire d'Assiut ainsi que ASIA4, ASIA5 et ASIA6 obtenus à partir d'échantillons de sang de différents patients atteints de cancer à l'Institut du cancer du sud de l'Égypte. Tous les isolats ont montré des capacités variées à produire des zones halo d'hydrolyse avec différents diamètres sur des plaques d'agar au sang, d'agar au plasma chauffé, d'agar à la caséine et d'agar au lait écrémé ainsi que différents pourcentages de lyse de caillots. Staphylococcus aureus ASIA3, ASIA4 et ASIA6 ont produit 4,83, 5,98 et 2,08 U/mL de staphylokinase sur un bouillon tryptone soja réduit à 1,95, 2,08 et 1,70 U/mL sur un bouillon d'extrait de levure à l'hydrolysat de caséine, respectivement. Français D'autre part, Staphylococcus aureus ASIA1, ASIA2 et ASIA5 ont donné 2,20, 2,93 et ​​3,65 U/mL sur CYEB contre 2,10, 1,88 et 3,41 U/mL sur TSB comme milieu de production. La staphylokinase produite par le producteur hyperactif Staphylococcus aureus ASIA4 a été augmentée de 7,64 fois (de 2,08 U/mL à 15,88 U/mL) sur le milieu de fermentation optimisé composé de 5,0 g de saccharose comme source de carbone, 10,0 g de soja comme source d'azote, 5,0 g de NaCl, 5,0 g de K2HPO4 et pH 7,0 qui a été inoculé avec l'isolat ASIA4 et incubé pendant 24 h à 35°C. Français De plus, l'activité de la staphylokinase a atteint son pic dans les conditions optimales de réaction enzymatique qui étaient un temps de réaction de 25 min, la caséine comme substrat, un pH de réaction de 8,0, une température de réaction de 40°C. De plus, elle a conservé 100 % de son activité à une température comprise entre 15 et 45°C et un pH compris entre 6,0 et 9,0. L'EDTA a inhibé l'activité enzymatique de 3,0 % à 32,2 % avec une augmentation de ses valeurs de 30,0 à 90,0 mM. Le MgCl2 à une concentration de 30 mM a augmenté l'activité enzymatique de 4 %, puis a légèrement diminué à des concentrations plus élevées, mais le NaCl était un puissant activateur de la staphylokinase à des concentrations inférieures à 90 mM.