Journal de la technologie microbienne et biochimique

Abstrait

Production, purification et caractérisation de la L-asparaginase à partir d'Aspergillus sp. ALAA-2000, une bactérie endophyte marine, dans des conditions de fermentation immergée et solide

Mervat Morsy Abbas Ahmed, Nageh Abo Dahab F, Taher Taha M et Fareed Hassan SM

Parmi tous les champignons endophytes récupérés de l'éponge molle marine Aplysina fistularis, 72,2 % étaient capables de produire de la L-asparaginase. Parmi tous les isolats obtenus, Aspergillus sp. ALAA-2000, le producteur hyperactif de l'agent anticancéreux, la L-asparaginase, sous fermentation submergée (SMF) et fermentation en milieu solide (SSF) de différents déchets agricoles a été sélectionné pour l'optimisation du processus d'extraction, l 'optimisation des paramètres physico-chimiques, qui concernent la production de L-asparaginases dans SSF et l'optimisation des paramètres de L-asparaginase purifiée. L'activité maximale de L-asparaginase de 23,34 U/ml a été récupérée à partir du soja avec de l'eau chaude à 40 °C et 150 tr/min pendant 30 min sous SSF et 30,64 U/ml sous fermentation submergée en utilisant le glucose comme source de carbone et l'asparagine comme source d'azote. Deux types de L-asparaginase (AYA-1 et AYA-2) ont été purifiés à partir du surnageant de culture d'Aspergillus sp. ALAA-2000 par précipitation au sulfate d'ammonium et chromatographie par filtration sur gel (sephadex G-200). Les poids moléculaires des enzymes étaient de 25 kDa (AYA-1) et 31 kDa (AYA-2). Les paramètres de la L-asparaginase purifiée ont été optimisés pour l'enzyme AYA-1 (pH 6,0, stable à 30 °C à 50 °C pendant 60 min, temps de réaction 15 min et concentration de substrat 1,275 mg/ml ) et l'enzyme AYA-2 (pH 10, stable à 30 °C à 70 °C pendant 60 min, temps de réaction 15 min et concentration de substrat 1 275 mg/ml). Alors que les inhibiteurs des métaloprotéases, les agents chélateurs EDTA, n'ont eu aucun effet sur la L-asparaginase. Ces résultats révèlent que la L-asparaginase n'était pas une métaloprotéase.