Journal de bioéquivalence et de biodisponibilité

Abstrait

Dialyse à l'équilibre rapide (RED) : une technique de criblage in vitro à haut débit pour la liaison aux protéines plasmatiques à l'aide de plasma humain et de plasma de rat

Jitendra Kumar Singh, Anant Solanki, Reema C Maniyar, Debarupa Banerjee et Vikas S Shirsath

La détermination du degré de liaison d'une molécule aux protéines plasmatiques est une phase critique du développement d'un médicament, car la quantité de médicament lié au plasma influence le dosage, l'efficacité, le taux de clairance et le potentiel d'interactions médicamenteuses du composé. La détermination des fractions libre (%Fu) et liée (%Bound) d'un article d'essai dans le plasma est donc un paramètre critique, qui est systématiquement déterminé dans le processus de découverte et de développement de médicaments. Cette détermination est rendue possible par la dialyse à l'équilibre, une méthode acceptée et standard pour l'estimation fiable de la fraction de médicament non liée dans le plasma. Bien qu'il s'agisse de la méthode préférée, la dialyse à l'équilibre a toujours été une méthode laborieuse, longue, coûteuse et difficile à automatiser. Un test de liaison médicament-protéine par dialyse à l'équilibre rapide (RED) utilisant la LC-MS/MS a été développé à l'aide d'une nouvelle technique qui a permis d'améliorer considérablement la précision du test et offre un avantage de rapidité. Un panel de composés couvrant une gamme de liaisons protéiques attendues a été testé dans le plasma d'espèces humaines et de rats. Une méthode sensible et sélective utilisant un spectrophotomètre de masse quadruple en tandem interfacé avec l'ionisation par électro-pulvérisation a été développée pour la quantification du médicament non lié dans le plasma prétraité. Les phases mobiles utilisées étaient 0,1 % d'acide formique dans l'acétonitrile : 0,1 % d'acide formique dans l'eau avec la méthode HPLC à gradient. La fraction non liée des médicaments a été détectée par spectromètre de masse fonctionnant en mode ESI. De plus, les données d'un ensemble de dix composés ont été comparées aux valeurs de la littérature. Avec la méthode décrite, il est possible de cribler un nombre relativement important de composés pour le PPB dans un environnement de découverte de médicaments.