Bioénergétique : Libre accès

Abstrait

Recommandations pour la culture à court terme de cardiomyocytes de rat viables en forme de bâtonnet

Rabia Johnson, PhiwayinkosiVusi Dludla, Christo John Frederick Muller, Faghri February et Johan Louw

Les cultures primaires in vitro de cardiomyocytes isolés de rats adultes deviennent un modèle de plus en plus populaire pour étudier les facteurs de stress du muscle cardiaque. Ce modèle peut être facilement manipulé dans un environnement contrôlé et les résultats obtenus peuvent fournir des informations précieuses sur la physiopathologie des maladies cardiaques. Au cours des dernières années, plusieurs méthodologies améliorées ont été décrites dans le développement d'une technique robuste pour aider à maintenir les cardiomyocytes en culture. Cependant, malgré ces avancées, la culture de cardiomyocytes primaires reste un défi. Dans cette étude, nous présentons une méthode simple mais reproductible pour l'isolement et la culture de cardiomyocytes viables en forme de bâtonnet. Les cardiomyocytes ont été maintenus dans du milieu 199 supplémenté avec ou sans sérum bovin fœtal. Leur viabilité a été évaluée à l'aide de bleu trypan tandis que l'activité métabolique a été mesurée à l'aide d'un test d'adénosine 5'-triphosphate. Les résultats obtenus dans cette étude ont été utilisés pour fournir des lignes directrices générales pour éviter les pièges liés aux faibles rendements de cardiomyocytes et à la faible cultivabilité subséquente des cardiomyocytes. Les cardiomyocytes isolés cultivés en présence de sérum de veau fœtal ont conservé leur morphologie en forme de bâtonnet strié in vitro pendant 72 h en culture, après quoi ils se sont aplatis et étalés. En revanche, les cardiomyocytes cultivés en l'absence de sérum de veau fœtal sont restés en forme de bâtonnet jusqu'à 120 h.