Journal of Aquaculture Research & Development

Abstrait

Rôle de la régulation de PmRab7 dans l'infection par le virus WSSV et validation fonctionnelle d'une petite molécule comme inhibiteur de la GTPase PmRab7

Amrendra Kumar, Sudhanshu Shekhar et Saravanakumar A*

Le syndrome des taches blanches (WSS) est une maladie virale qui menace considérablement les industries d'élevage de crevettes. Il est causé par le baculovirus du syndrome des taches blanches (WSSB). Les crevettes (P. monodon et L. vannamei) sont incapables de se défendre contre les matériaux « non-soi » et les agents pathogènes, en raison d'une réponse immunitaire adaptative moins définie. Par conséquent, le présent travail a été donné en priorité pour étudier la régulation du transcrit PmRab7, qui pourrait être un récepteur du WSSV (vP28) après implication d'un inhibiteur de petite molécule. Au total, 70 petites molécules GTPase ont été initialement criblées, contre la structure 3D de PmRab7. Parmi toutes, la molécule CID 1067700 a été sélectionnée pour l'amarrage moléculaire (IFD) avec PmRab7 en présence de GTP, GDP et Mg++. De plus, une petite molécule a été introduite dans la formulation d'aliments pour P. monodon et la régulation transcriptionnelle de PmRab7 a été relativement quantifiée par rapport à l'IFN-α en tant que gènes de ménage pendant l'infection par le WSSV. Nous avons identifié ici un inhibiteur de PmRab7, CID 1067700, en ciblant le domaine de liaison à l'ADN de PmRab7 à l'aide d'une stratégie de criblage virtuel. CID 1067700 supprime préférentiellement l'activité GTPase pour modifier le GTP et le Mg++ de leurs positions. De plus, CID 1067700 inhibe l'expression des gènes cibles en aval de PmRab7, ainsi CID 1067700 représente de nouvelles sondes pour le développement d'inhibiteurs spécifiques ciblant le domaine de liaison à l'ADN de PmRab7 et un potentiel thérapeutique contre le WSSV. Des changements substantiels ont été observés dans la régulation de PmRab7 et la multiplication du WSSV dans l'essai initial de CID 106700. CID 106700 conduit à une inactivation réussie de PmRab7 en modifiant le GTP et le Mg++ de leurs positions natives. La régulation de PmRab7 a été augmentée de 5 à 8 fois pendant les 72 heures d'infection. Le remplacement du GTP par de petites molécules a révélé une régulation négative significative du gène PmRab7 lors de l'infection par le WSSV. Il est remarquable de constater que la charge virale (quantifiée de manière absolue) a également été réduite lorsque le PmRab7 était régulé à la baisse. L'internalisation du WSSV est directement liée à la régulation du PmRab7.