Journal des troubles sanguins et de la transfusion

Abstrait

Le sérum produit à partir de plasma frais congelé et de surnageant de cryoconservation périmés favorise la prolifération des cellules humaines : des alternatives rentables au sérum fœtal bovin

Kazuki Ishiyama, Mika Ogawa, Hidefumi Kato, Kyosuke Takeshita, Ryuzo Ueda, Takayuki Nakayama*

Contexte : Le sérum fœtal bovin (FBS) est le facteur de croissance le plus couramment utilisé dans la culture cellulaire. Cependant, la demande de suppléments de culture cellulaire sans xénobiotiques à usage clinique conformes aux normes de bonnes pratiques de fabrication augmente à mesure que les thérapies cellulaires se développent. Le sérum humain a été proposé comme alternative au FBS. En raison de la disponibilité limitée des donneurs et de l'utilisation efficace des ressources médicales, nous avons tenté de produire du sérum à partir de plasma frais congelé (FFP) et de surnageant de cryoconservation (CS) périmés et les avons testés comme substituts du FBS.

Résultats : Nous avons constaté qu'une incubation d'une heure de FFP ou de CS avec un taux physiologique de thrombine et de chlorure d'aluminium (CaCl ₂ ) éliminait pratiquement tout le fibrinogène. Des études de prolifération comparatives avec du FBS et des lysats plaquettaires humains (hPL) ont montré que, par rapport au FBS, le sérum FFP présentait des effets prolifératifs similaires ou supérieurs sur 8 lignées cellulaires humaines : cellules stromales mésenchymateuses dérivées de la moelle osseuse (BMSC), cellules stromales mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux (ADSC), HeLa, 293T, MG-63, HL-60, K562 et Meg-A2, à l'exception des cellules Saos-2, tandis que le sérum CS présentait des effets prolifératifs plus faibles sur les cellules BMSC, ADSC et Saos-2. Le hPL favorisait la croissance des cellules BMSC et ADSC plus vigoureusement que le sérum FFP et CS.

Conclusions : Le sérum FFP et le sérum CS peuvent être produits avec de la thrombine et du CaCl ₂ rapidement et de manière économe en produits sanguins et fonctionnent comme de puissantes alternatives au FBS pour la culture de cellules humaines.