Journal de bioéquivalence et de biodisponibilité

Abstrait

Estimation simultanée de la fluoxétine et de la norfluoxétine dans le plasma par RP-HPLC utilisant la dérivatisation pré-colonne pour améliorer la sensibilité aux UV

Smita T Kumbhar, Kundan B Ingale Prafulla B Choudhari et Manish S Bhatia

Une méthode rapide de chromatographie liquide à haute performance est décrite pour l'estimation simultanée de l'antidépresseur largement utilisé, la fluoxétine et de son principal métabolite, la norfluoxétine, dans le plasma humain. La dérivatisation pré-colonne de la norfluoxétine a été réalisée en utilisant du 4-diméthylaminobenzaldéhyde (PDAB) pour surmonter les limites de sensibilité de la norfluoxétine. Après extraction liquide-liquide, la séparation des analytes et de l'étalon interne de l'interférence de la matrice endogène a été réalisée en utilisant une colonne HIQ sil ODS en phase inverse (250 mm de longueur x 4,6 mm de diamètre interne) KYA TECH (Japon) et dosée par absorption ultraviolette à 227 nm. La phase mobile isocratique (1 ml/min.) constituée d'acétonitrile : eau : triéthylamine : 0,01 M d'acide orthophosphérique (OPA) (70:30:0,5:2) a été utilisée pour séparer la fluoxétine, la norfluoxétine et l'étalon interne, le nébivolol. Français Les temps de rétention relatifs étaient de 2,49, 4,24 et 7,29 min pour la norfluoxétine, la fluoxétine et le nébivolol, respectivement. La durée d'exécution chromatographique était de 10 min et les rapports de surface de pic des analytes à l'IS ont été utilisés pour l'analyse de régression de la courbe d'étalonnage. La linéarité a été obtenue sur la plage de concentrations de 10 à 60 μg/ml pour les deux substances. Le pourcentage moyen de récupération ± ET s'est avéré être de 101,23 % ± 1,0 et 100,69 ± 0,67 pour la fluoxétine et la norfluoxétine respectivement. La méthode semble adaptée, en termes d'exactitude et de précision, à la détermination des taux plasmatiques de fluoxétine du patient ; en outre, elle est rapide et sensible.