Santé bucco-dentaire et gestion dentaire

Abstrait

Normalisation de l'isolement et de l'expansion des cellules du tissu conjonctif de la muqueuse buccale

Fernandes LA, Nascimento BL, Lucato-Budziak MC, Figueiredo CM, Carneiro E.

Objectif : L'objectif de cette étude était d'établir un protocole pour l'isolement et l'expansion d'une population de cellules fibromésenchymateuses du tissu conjonctif de la muqueuse buccale pour de futurs protocoles de bio-ingénierie. Méthodes : Pour l'isolement des fibroblastes et des cellules progénitrices, nous avons utilisé des morceaux d'échantillons chirurgicaux de patients ayant une indication de chirurgie buccale. Le protocole d'isolement était le suivant : le tissu a été lavé avec du tampon phosphate salin (PBS) complété par un antibiotique-antimycosique (PSA). Le tissu a été placé dans un tube à essai contenant de la collagénase de type II et a été incubé toute la nuit au four. Après incubation, la collagénase a été collectée et le tissu a été à nouveau lavé une fois avec du PBS + PSA. Par la suite, le test de l'unité formant colonie (UFC) a été effectué. Français Les cellules (1,0 × 105 ) ont été plaquées sur une boîte de 10 cm² contenant du milieu de Eagle modifié par Dulbecco (DMEM) avec une teneur élevée en glucose, complété par 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). Les cellules ont été fixées avec 10 % de formol et colorées au violet de cristal avant le comptage des colonies. Le test a été effectué en triple. Résultats : Les cellules de tous les échantillons ont montré une morphologie homogène avec une apparence étoilée caractéristique. La seule différence était dans le nombre de colonies formées. Il y a eu une augmentation significative du nombre de colonies formées le jour 1 par rapport à celles formées le jour 0, et une diminution significative par rapport à celles formées le jour 2. Conclusion : Il a été possible d'établir un protocole pour la culture primaire de fibroblastes dérivés de la muqueuse buccale humaine.