Technologie génétique

Abstrait

Stratégies et bonnes pratiques pour le clonage de petits ARN

Hui Dai, Weifeng Gu

Le séquençage à haut débit est devenu un outil standard et puissant pour l'analyse des acides nucléiques, principalement en raison de sa sensibilité et de sa commodité. Les petits ARN jouent un rôle important dans la régulation des gènes cellulaires et viraux. Les méthodes conventionnelles d'analyse des petits ARN sont fastidieuses et manquent souvent de précision, de spécificité et de sensibilité pour de nombreuses espèces de petits ARN. Par conséquent, le séquençage à haut débit devient un outil indispensable pour analyser les petits ARN. Cependant, il est difficile de générer une bibliothèque de petits ARN fiable et représentative pour le séquençage à haut débit, car les petits ARN sont généralement exprimés à des niveaux extrêmement faibles et contiennent souvent des modifications qui affectent la construction de la bibliothèque, provoquant généralement des lectures biaisées. Cette revue compare différentes stratégies pour générer des bibliothèques de petits ARN de haute qualité et fiabilité, et fournit des recommandations sur les meilleures pratiques pour préparer des bibliothèques d'ARN de séquençage à haut débit.