Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrait

Analyse structurale de la cyclophiline de Moniliophthora Perniciosa et activité inhibitrice de la cyclosporine sur la germination et la croissance des champignons

Paulo S Monzani, Humberto M Pereira, Karina P Gramacho, Fatima C Alvim, Flávio V Meirelles, Glaucius Oliva et Júlio CM Cascardo

Moniliophthora perniciosa est l'agent causal de la maladie du balai de sorcière du cacao. Les cyclophilines ont été impliquées dans une grande variété de processus cellulaires, y compris la réponse aux stress environnementaux, le contrôle du cycle cellulaire, la régulation de la signalisation calcique et le contrôle transcriptionnel. L'implication des cyclophilines dans la pathogénicité a été décrite à la fois chez les champignons pathogènes envers les animaux et les plantes. Chez la levure, la calcineurine et la cyclophiline sont impliquées dans la morphogenèse et la virulence fongiques. Il existe des preuves que la cyclophiline interagit avec la calcineurine en l'absence de cyclosporine A (CsA), et il a été proposé que l'activité de CsA agisse dans l'interaction régulatrice entre la cyclophiline et la calcineurine ; des actions fongistatiques ou fongicides ont également été observées dans cette activité. Le gène de la cyclophiline de M. perniciosa issu de l'ADNc du corps fructifère dans le vecteur pET28a a été cloné et la protéine a été exprimée, purifiée et cristallisée. Les structures de cyclophiline dans les formes apo et liée à CsA ont été résolues à 1,85 et 1,47 Ǻ, respectivement. La comparaison des structures de différents organismes indique des structures conservées de cyclophilines. De petites différences ont été trouvées dans les formes apo et liées ; par conséquent, il s'ensuit que les structures de cyclophiline ne présentent pas de modifications accentuées en présence du ligand. Cependant, diverses liaisons hydrogène entre les chaînes latérales d'acides aminés et les molécules d'eau sont rompues dans le site du ligand lorsque CsA est lié. Les tests de spores de germination utilisant CsA ont montré une faible activité inhibitrice de la germination, mais une forte inhibition de la croissance du tube germinatif. Ces résultats montrent que la cyclophiline joue un rôle important dans le processus de croissance, mais pas dans la germination, suggérant ainsi que la cyclophiline est une cible potentielle pour l'action fongistatique contre M. perniciosa.